Pharmacokinetic study of diclophenac sodium in rat plasma by high-performance liquid chromatography

Abstract

The aim of this study is to determine pharmacokinetics of diclofenac sodium in the experiment on rats by the method of high-performance liquid chromatography. Identification and quantitative determination of diclofenac sodium in the substance of diclofenac sodium were carried out by the method of high-performance liquid chromatography. For study conduct, a total of 94 male rats with body weight of 250-300 g were used. Experimental animals were subdivided into 15 groups. Diclofenac sodium was diluted in purified water and administered per os at the doses of ED50 and ½ ED50, equivalent to 8 mg/kg and 4 mg/kg of animal body weight, respectively. Animals were sacrificed in 15 min, 30 min, 60 min, 90 min, 120 min, 240 min, and 360 after drug administration. For extraction of diclofenac sodium from rat plasma samples, we used a method of solid-phase extraction, which had been modified due to microconcentrations of the active substance. Dependence of diclofenac sodium concentration on time and dose was studied by the method of high-performance liquid chromatography. In the result of the study, quantitative content of diclofenac sodium substance and suitability of the doses studied (4 mg/kg and 8 mg/kg) were confirmed. The study conducted revealed no dynamics of time, during which diclofenac sodium was present in systemic blood flow, on the dose. The results, which had been proved by chromatograms of diclofenac sodium and control sample (plasma without diclofenac) for each time interval, were obtained. First concentrations of diclofenac sodium in rat plasma are registered in rat plasma in 15 min after dose administration at the doses of 4 and 8 mg/kg. That is why this time index is recommended for further preclinical and clinical studies.

Метою даного дослідження є встановлення фармакокінетики диклофенаку натрію в експери- менті на щурах методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ). Ідентифікацію та кількісне визначення диклофенаку натрію в субстанції диклофенаку натрію проводили мето- дом ВЕРХ. Для проведення експерименту було використано 94 щурів-самців масою 250-300 г. Тварини в експерименті були розділені на 15 груп. Диклофенак натрію розчиняли у воді очи- щеній та вводили перорально в дозах ЕД50 та ½ ЕД50, що складає відповідно 8 мг/кг та 4 мг/кг маси тіла тварин. Тварин виводили з досліду через 15 хв, 30 хв, 60 хв, 90 хв, 120 хв, 240 хв та 360 хв після введення препарату. Для екстрагування диклофенаку натрію із зразків плазми крові щурів був використаний метод твердофазової екстракції, який був модифікований нами з урахуванням мікроконцентрації діючої речовини. Залежність концентрації диклофенаку натрію від часу та дози дослідили за допомогою методу ВЕРХ. При проведенні досліджень підтверджено кількісний вміст субстанції диклофенаку натрію та відповідність доз, які вив- чаються (4 мг/кг і 8 мг/кг). У результаті проведених досліджень не виявлено відмінностей у ди- наміці часу знаходження диклофенаку натрію у системному кровообігу від дози. Отримані ре- зультати підтверджені хроматограмами диклофенаку натрію та контрольного зразка (плазма крові без диклофенаку) на кожний інтервал часу. Перші концентрації диклофенаку натрію реєструються в плазмі крові щурів через 15 хв після введення субстанції у дозах 4 та 8 мг/кг. Тому цей часовий показник рекомендується для подальших доклінічних та клінічних досліджень.

Целью данного исследования является установление фармакокинетики диклофенака натрия в эксперименте на крысах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии(ВЭЖХ). Идентификацию и количественное изучение диклофенака натрия в субстанции диклофенака натрия проводили методом ВЭЖХ. Для проведения эксперимента были использованы 94 кры- сы-самцы массой 250-300 г. Животные в эксперименте были разделены на 15 групп. Дикло- фенак натрия растворяли в воде очищенной и вводили перорально в дозах ЕД50 та ½ ЕД50, что составляет 8 мг/кг и 4 мг/кг массы тела животных. Животных выводили из эксперимента через 15 мин, 30 мин, 60 мин, 90 мин, 120 мин, 240 мин та 360 мин после введения препарата. Для экстрагирования диклофенака натрия из образцов плазмы крови крыс был использован метод твердофазовой экстракции, который был модифицирован нами с учетом микроконцент- рации действующего вещества. Зависимость концентрации диклофенака натрия от времени и дозы исследовали с помощью метода ВЭЖХ. При проведении исследований подтверждено количественное содержание субстанции диклофенака натрия и соответствие изучаемых доз (4 мг/кг и 8 мг/кг). В результате проведенных исследований не определены различия в дина- мике времени нахождения диклофенака натрия в системном кровотоке от дозы. Полученные результаты подтверждены хроматограммами диклофенака натрия и контрольного образца (плазма крови без диклофенака) на каждый интервал времени. Первые концентрации дикло- фенака натрия регистрируются в плазме крови крыс через 15 мин после введения субстанции в дозах 4 та 8 мг/кг. Поэтому этот показатель времени рекомендуется для дальнейших докли- нических и клинических исследований.