Розробка умов ізолювання антидепресанту пароксетину з біологічних рідин

Abstract

Метою дослідження було розробити ефективні умови ізолювання нового антидепресанту пароксетину з мо- дельних проб крові та сечі за допомогою рідинної екстракції з подальшим визначенням аналіту методом УФ- спектрофотометрії. Матеріали та методи. Дослідження з ізолювання виконували з модельними пробами донорської крові та сечі людини, які містили пароксетин. Етап пробопідготовки крові попередньо передбачав осадження формених елементів шляхом додавання до неї 10 % розчину кислоти трихлорацетатної. Ендогенні домішки видаляли шляхом екстракційного очищення хлороформом з кислого середовища за рН 1 та екстрагували пароксетин з досліджуваних біологічних рідин етилацетатом за рН 10. Отримані органічні екстракти додатково очищували з використанням методу ТШХ. Після цього визначали пароксетин в отриманих елюатах з хроматограм УФ- спектрофотометричним методом. Результати та їх обговорення. Значення Rf пароксетину в рухомій фазі етилацетат-метанол-25 % розчин амонію гідроксиду (85:10:5) становило 0,42 ± 0,04. УФ-спектри елюатів з хроматограм мали максимуми світ- лопоглинання за довжини хвиль 233 ± 2, 265 ± 2, 272 ± 2 та 293 ± 2 нм і за характером світлопоглинання були ідентичні з УФ-спектром стандартного розчину пароксетину в 0,1 M розчині кислоти хлоридної. Кількісне визна- чення проводили за λmax293 нм за рівнянням калібрувального графіка y = 0,0094x – 0,02. Опрацьовані методики дозволили виділити з сечі 70,0 ± 4,0 % пароксетину, з плазми крові – 26,0 ± 3,0 % та з осаду крові після його попереднього відокремлення від плазми додатково ще 5,4 ± 0,6 % досліджуваного антидепресанту. Висновки. Визначено оптимальні умови пробопідготовки модельних проб крові та сечі методом рідинної екстракції стосовно пароксетину. Отримані результати мають прикладне значення для створення алгоритму токсикологічного дослідження біологічних рідин на присутність зазначеного антидепресанту в разі смертельних інтоксикацій лікарськими препаратами.

Aim. To develop optimized conditions for isolating the new antidepressant paroxetine from model blood and urine samples by the liquid extraction followed by the determination of the analyte using the UV spectrophotometric method. Materials and methods. The studies were performed with model samples of the donor blood and urine spiked with paroxetine. In the sample preparation of blood, the form elements were previously precipitated by 10 % solution of trichloroacetic acid. Endogenous impurities were removed by the extraction purification with chloroform from an acidic medium at pH 1, and paroxetine was extracted from the biological fluids under study with ethyl acetate at pH 10. The organic extracts obtained were further purified using the TLC method. After that, the determination of paroxetine in the eluates obtained from chromatograms was performed using the UV spectrophotometric method. Results and discussion. The Rf value of paroxetine in the mobile phase of ethyl acetate-methanol-25 % ammonium hydroxide solution (85:15:10) was 0.42 ± 0.02. The UV spectra of eluates from chromatograms had absorption maxima at wavelengths of 265 ± 2, 272 ± 2 and 293 ± 2 nm and matched with the UV spectrum of a standard solution of paroxetine in 0.1 M solution of hydrochloric acid. The quantitative determination was performed at λmax293 nm according to the equation of the calibration curve y=0.0094x–0.02. The methods developed allowed to isolate 70.0 ± 4.0 % of paroxetine from the urine, 26.0 ± 3.0 % from the blood plasma and additionally 5.4 ± 0.6 % of the antidepressant studied from the blood cell sediment after its preliminary separation from the blood plasma. Conclusions. The optimized conditions for sample preparation of model blood and urine samples by the liquid extraction method in relation to paroxetine have been determined. The results obtained are of applied practical significance for creating an algorithm in the toxicological study of biological fluids for the presence of this antidepressant in fatal drug intoxications.