Експериментальне обгрунтування інтенсивності ультразвуку для руйнування клітин грибів Сandida

Abstract

Вступ. Сьогодні у багатьох країнах світу активно ведуться наукові роботи з розробки вакцин для попередження та лікування кандидозної інфекції. Ми вважаємо перспективним розроблення субодиничної вакцини на основі білків та полісахаридів вивільнених з дезинтегрованих клітин грибів C. albicans та C. tropicalis. Мета. Визначити оптимальне значення інтенсивності ультразвукового випро- мінювання при дезінтеграції клітин грибів C. albicans та C. tropicalis. Матеріали та методи. Для попередження контамінації усі маніпуляції проводили в ламінарному боксі та підтримували асептичні умови. Одержану біомасу клітин грибів C.albicans та C.tropicalisз концентрацією 8х108-8х109 у 1 мл окремо, в об’ємі 10 мл стерильного ізотонічного 0,9 % розчину натрію хлориду піддавали дії ультразвуку для руйнування клітин грибів на апараті УЗУУ-21 при частоті 22 кГц, інтенсивності 1, 5 та 10 Вт/см2 та при температурі 25 ± 2 °С. Результати. При дії ультразвуку з інтенсивністю 5 Вт/см2 на клітини грибів C. albicans та C. tropicalis було виявлено вміст білків 0,33 ± 0,03мг/мл та 0,31 ± 0,03мг/ мл, а при інтенсивності 10 Вт/см2- 0,34 ± 0,03мг/мл та 0,33 ± 0,03мг/мл при 15 хв експозиції. Тому не раціонально використовувати інтенсивність більше 5 Вт/см2

Введение. Сейчас активно во многих странах мира ведутся научные работы по разработке вакцин для предупреждения и лечения кандидозной инфекции. Мы считаем перспективным разработку субединичной вакцины на основе белков и полисахаридов выявленных с дезинтегрированных клеток грибов C. albicans и C. tropicalis. Цель. Определить оптимальное значение интенсивности ультразвукового излу- чения при дезинтеграции клеток грибов C. albicans и C. tropicalis. Материалы и методы. Для предупреждения контаминации все манипуляции проводили в ламинарном боксе и поддерживали асептические условия. Полученную биомассу клеток грибов C. albicans и C. tropicalis с концентрацией 8х108-8х109 в 1 мл отдельно в объеме 10 мл стерильного изотонического 0,9% раствора натрия хлорида подвергали воздействию ультразвука для разрушения клеток грибов на аппарате УЗУУ-21 при чистоте 22 кГц, интенсивности 1, 5 и 10 Вт/см2 и при температуре 25 ± 2 ° С. Результаты. При воздействии ультразвука с интенсивность 5 Вт/см2 на клетки грибов C. albicans и C. tropicalis было обнаружено содержание белков 0,33 ± 0,03 мг/мл и 0,31 ± 0,03 мг/мл, а при интенсивности 10 Вт/см2 - 0,34 ± 0,03 мг/мл и 0,33 ± 0,03 мг/мл при 15 мин экспозиции. Поэтому рационально использовать интенсивность более 5 Вт/см2

Introduction. Now, active research aimed at developing vaccines for prevention and treatment of candidal infections is being conducted in many countries. We believe that development of subunit vaccines based on proteins and polysaccharides released from disintegrated cells of C. albicans and C. tropicalis to be promising. The aim of the research was to determine the optimum intensity of ultrasonic exposure for cell disintegration of C. albicans and C. tropicalis. Materials and methods. To prevent contamination, all procedures were carried out in a laminar box and aseptic conditions were maintained. The resulting biomass of cellsof C. albicans and C. tropicalisin the concentration of 8х108-8х109 in 1 ml separately in a volume of 10 ml of sterile isotonic 0.9% sodium chloride was exposed to ultrasound for cell disruption byUZUU-21 (frequency - 22 kHz, intensity - 1, 5 and 10 W/cm2 and temperature - 25 ± 2 °C). Results. After exposure of cells of fungi C. albicans and C. tropicalis toultrasound with intensity of 5W/cm2, the found protein content was 0.33 ± 0.03 mg/ml and 0.31 ± 0.03 mg/ml, while with the intensity of 10 W/cm2 it was 0.34 ± 0.03 mg/ml and 0.33 ± 0.03 mg/ml at 15 min exposure. It is no more rational to use the intensity of 5W/cm2