Експериментальне дослідження фармакологічних властивостей екстракту з листя персика звичайного

Abstract

Дисертація присвячена експериментальному обґрунтуванню доцільності застосування густого екстракту листя персика (ГЕЛП) як нового стреспротекто-ра та імунокоректора. У роботі досліджено ГЕЛП, отриманий на кафедрі хімії природних сполук НФаУ під керівництвом д. фарм. н., проф. В. С. Кисличенко Встановлено, що ГЕЛП є малотоксичною речовиною (IV клас токсичності, LD50>5000 мг/кг при внутрішньошлунковому введенні щурам). У тесті «статичне навантаження» встановлена здатність ГЕЛП підвищувати витривалість тварин. В умовах хронічного іммобілізаційного стресу (ХІС) доведено протектив-ний вплив ГЕЛП на стан ГГНС, метаболічних процесів, ЦНС, здатність знижу-вати рівень тривожності у тварин та відновлювати порушену активність імунної системи. За виразністю стреспротекторної дії ГЕЛП за більшістю показників був на рівні препарату порівняння «Імуно-Тон». У дослідах in vitro встановлено імуномодулювальний ефект ГЕЛП: засіб у вищій концентрації знижує кількість імунокомпетентних життєздатних клітин глоткових мигдалин, а у нижчій ‒ не чинить негативного впливу на них, не впливає на експресію поверхневих антигенів (СD4, СD25, СD16, СD95) лімфо-цитів, підвищує продукцію IgA та активність ендогенних цитотоксичних клітин, знижує продукцію прозапальних цитокінів ІЛ-1, не змінюючи утворення проти-запальних цитокінів ІЛ-4 і ІЛ-10 та ІФН-γ. Доведена мембраностабілізувальна та протизапальна активність ГЕЛП. Ключові слова: стрес, густий екстракт листя персика звичайного (ГЕЛП), гіпоталамо-гіпофізарно-наднирникова система; перекисне окиснення ліпідів, антиоксидантна система, цитокіни, стреспротекторна активність, імунокоригу-вальна дія, мембраностабілізувальна дія.

Диссертация посвящена экспериментальному обоснованию целесообраз-ности применения густого экстракта листьев персика (ГЭЛП) как нового стресспротектора и иммунокорректора. В работе был исследованный ГЭЛП, полученный на кафедре химии при-родных соединений НФаУ под руководством д. фарм. н., проф. В. С. Кисличен-ко Установлено, что ГЭЛП является малотоксичным веществом (IV класс ток-сичности, LD50>5000 мг/кг при внутрижелудочном введении крысам). В тесте «статической нагрузки» установлена его способность повышать выносливость животных. В условиях хронического иммобилизационного стресса (ХИС) доказано протективное влияние ГЭЛП на состояние ГГНС, метаболических процессов, ЦНС, его способность снижать уровень тревожности у животных и восстанав-ливать нарушенную активность иммунной системы. По выразительности стресспротекторного действия ГЭЛП по большинству показателей был на уров-не препарата сравнения «Иммуно-Тон». В опытах in vitro установлен иммуномодулирующий эффект ГЭЛП: сред-ство в более высокой концентрации снижает количество жизнеспособных им-мунокомпетентных клеток глоточных миндалин, а при более низкой ‒ не оказы-вает негативного влияния на них, не влияет на экспрессию поверхностных ан-тигенов (СD4, СD25, СD16, СD95) лимфоцитов, повышает продукцию IgA и ак-тивность эндогенных цитотоксических клеток, снижает продукцию провоспа-лительных цитокинов ИЛ-1, не влияя на образование противовоспалительных цитокинов ИЛ-4 и ИЛ-10 и ИФН-γ. Доказана мембраностабилизирующая и противовоспалительная активность ГЭЛП. Ключевые слова: стресс, густой экстракт листьев персика обыкновенного (ГЭЛП), гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система; перекисное окис-ление липидов, антиоксидантная система, цитокины, стресспротекторная акти-вность, иммунокорригирующее действие, мембраностабилизирующее

The dissertation of Sharifov H. Sh. is devoted to the experimental substantia-tion of the expediency of using a peach leaf thick extract (PLTE) as a new stressprotector and immunocorrector. The work extends and deepens knowledge about the pharmacological properties of PLTE. In this work the peach leaf thick extract obtained at the department of chemis-try of natural compounds of NUPh under the direction of prof. Kislychenko V. S. was studied. For the first time the theoretical substantiation and experimentally proved the presence of acroprotective, stressprotective and immunocorrective activity of PLTE on experimental models in vivo and in model systems in vitro were done. According to the results of screening studies in the static load test, the ability of PLTE to increase the endurance of animals, which was the highest (at 45.3%) at a dose of 100 mg/kg, was determined as conditionally effective and was used for fur-ther study. According to the expressiveness of the protective effect of PLTE was su-perior under the reference agent (RA) «Immuno-Ton». It was established that PLTE in a conditionally effective dose of 100 mg/kg, as well as the RA «Immuno-Ton», did not have a likely effect on the state of the central nervous system in the «open field» test. As a result of the acute toxicity study, it was found that PLTE at a dose of 5000 mg/kg does not cause death of animals, does not affect the condition of the internal organs, which characterizes it as a low-toxic substance (IV class toxicity, LD50> 5000 mg/kg). Under the conditions of chronic immobilization stress (ChIS), the protective ef-fect of PLTE on the state of hypothalamic-pituitary-adrenal system (HPAS) has been established, which is confirmed by a decrease in the degree of ulcerative stomach damage, adrenal glands hypertrophy and involution of thymus. The positive influence of PLTE and the RA «Immuno-Ton» on the state of metabolic processes, the system of lipid peroxidation (LPO) / antioxidant protection (AOP) and severity of cytolytic processes in conditions of ChIS was found in the normalization of carbohydrate metabolism, of hyperlipidemia, inhibition of cytolytic processes, strengthening of antioxidant defense and inhibition of LPO in erythro-cytes. By the severity of antioxidant activity, the investigated agent PLTE the com-parator «Immuno-Ton», more effectively increasing the activity of catalase and re-duced glutation (RG). In the tests, «elevated cross-labyrinth» and «open field», the PLTE and the comparator «Immuno-Ton» reduce the level of anxiety in experimental animals, which was caused by ChIS. 24 Morphologically, it was found that PLTE contributed to the reduction of mor-phological features of functional changes in the state of adrenal glands in rats com-pared with stress control, inhibiting the increased activity of cortical adrenocorticocytes, neuroendocrinocytes of the brain layer, reducing the width of the beam region and the diameter of the nuclei of spongiocytes. According to the expres-siveness of the stress-protective effect in this experiment, the investigated agents of PLTE for the majority of indicators was at the level of the RA. The ability of PLTE to restore the activity of immune system, which is dis-turbed under stress, is demonstrated by the phagocytic index and phagocytic number increasing, normalization of the cellular composition of the blood, the preservation of the ratio of specific and non-specific immunological reactions at the physiological level, consequently, a decrease in the degree of endogenous intoxication of the body. Histologically the protective effect of PLTE on the thymus-lymphatic system has been proved, as evidenced by an increase in the width of the marginal zone of the lymph nodes and the clutches, the number of structures of white spleen, the reduction of signs of stress hypoxia ‒ the number of white pulp structures with central artery spasm and reduction of reactive changes in the thymus, which characterizes the phas-es of the accidental transformation from the third to fourth to the first. According to the expressiveness of the stress-protective effect PLTE by most indicators was at the level of the RA syrup «Immuno-Ton». In vitro the immunotropic effect of PLTE was established: the higher dose agent reduces the number of viable cells, and at the lower dose does not have a nega-tive effect on the immunocompetent cells, does not affect the expression of surface antigens (CD4, CD25, CD16, CD95) of lymphocytes, increases the production of IgA in 1.2 times and activity of endogenous cytotoxic cells in 3.6 times. The ability of PLTE to reduce the production of inflammatory cytokines IL-1 without altering the formation of anti-inflammatory cytokines IL-4 and IL-10 and IFN-γ, which can be considered as one of the mechanisms of its immunomodulatory and anti-inflammatory action, is established. In the model of spontaneous hemolysis, PLTE exhibits a moderate membrane-stabilizing activity, the severity of which is not inferior to the antioxidant vitamin E and exceeds the effect of the comparator «Immuno-Ton». In the carrageenan edema of paws in rats have shown that PLTE ex-hibits a moderate anti-inflammatory activity at a dose of 50 mg/kg for the first four hours and at a dose of 100 mg/kg for only five hours of carrageenan edema. This suggests that in anti-inflammatory effect of the PLTE, a certain role has an effect on the activity of biogenic amines, whereas the antiprostaglandin mechanism is not leading. The obtained results substantiate the feasibility of further study of PLTE as a perspective agent with stress-protective and immunocorrective action, in implementa-tion of which cytokine-modulating, antioxidant anand membranostabilizing properties play important role. Key words: stress, thick leaf peach extract, hypothalamic-pituitary adrenal sys-tem; lipid peroxidation, antioxidative system, cytokines, stress-protective activity, immunocorrective action, membrane-stabilizing action.