Цілеспрямований пошук рослинної сировини нейромедіаторної дії серед представників родин Lamiaceae та Ranunculaceae

Abstract

Вперше проведено фармакогностичне вивчення лікарських рослин рутвиці смердючої (трава та корені) та сону лучного (трава) та визначені параметри стандартизації для сировини. Проведені дослідження з апробації методик контролю якості м'яточнику чорного трави у відповідності до вимог монографій ДФУ та ЄФ, які використані при розробці монографії ДФУ 2.0 Т.3 «М'яточник чорний». Вперше методом ГХ/МС був визначений вміст 15 вільних та зв’язаних амінокислот у сону лучного траві, рутвиці смердючої траві та коренях. Для всіх видів сировини високим вмістом характеризуються глютамінова та аспарагінова кислоти. Методом атомно-емісійної спектрографії визначено вміст 15 макро- та мікроелементів. Вперше методом ВЕРХ у сону лучного траві було ідентифіковано 9 сполук фенольної природи: 5 флавоноїдів, 2 гідроксикоричні кислоти та 2 кумарини. Вперше методом ГХ/МС у сону лучного траві, рутвиці смердючої траві та коренях визначені вільні цукри та сума вільних та зв’язаних цукрів з переважаючим вмістом останніх та вміст жирних кислот: у сону лучного траві – 13, у рутвиці смердючої траві – 8, у коренях – 10. Одержано екстракти м'яточнику чорного трави, рутвиці смердючої трави та сону лучного трави, для яких розроблені параметри стандартизації, визначена фармакологічна дія. Новизна дисертаційних досліджень підтверджена патентами України на корисну модель. Вперше розроблено добавку дієтичну комбінованого складу «Мемофіт» (виробник ТОВ «ФФ «Вертекс», м. Харків), визначені її параметри стандартизації, розроблені методики контролю, досліджено нейромедіаторну дію та гостру токсичність.

Впервые проведено фармакогностическое изучение лекарственных растений нейромедиаторного действия среди представителей семейств Lamiaceae и Ranunculaceae родов Thalictrum и Pulsatilla – василистника вонючего (трава и корни) и прострела лугового (трава). В исследуемых видах сырья идентифицировано и определено количественное содержание макро- и микроэлементов, аминокислот, сахаров, фенольных соединений, жирных кислот, сапонинов. Впервые проведено морфолого-анатомическое исследование с определением диагностических признаков василистника вонючего травы и прострела лугового травы. Для сырья определенные показатели качества: потеря в массе при высушивании (не больше 12 %), общая зола (не больше 2 %), зола нерастворимая в кислоте хлористоводородной (не больше 1,5 %), посторонние примеси (не больше 5 %), содержание флавоноидов для василистника травы (не менее 1,5 %), содержимое сапонинов для прострела травы (не менее 2 %). По результатам полученных экспериментальных данных оформлено информационное письмо о нововведении в системе здравоохранения "Параметры стандартизации василистника вонючего травы". Проведены исследования по апробации методик контроля качества белокудренника черного травы в соответствии с требованиями монографий ГФУ и ЕФ, которые использованы при разработке монографии ГФУ 2.0 Т.3 «Белокудренник черный». Результаты исследований по разработки параметров стандартизации белокудренника черного травы были использованы при разработке ТУ В 15.8-31062507-022:2009 "Сырье растительное, натуральное для производства добавок диетических". Методом атомно-эмиссионной спектрографии было определено содержание 15 макро- и микроэлементов в прострела лугового траве, василистника вонючего траве и корнях. Впервые методом ГХ/МС было установлено содержание 15 свободных и связанных аминокислот в прострела лугового траве, василистника вонючего траве и корнях. Для всех видов сырья высоким содержанием характеризовались глютаминовая и аспарагиновая кислоты: в прострела лугового траве 13,41±0,04 мкг/мг и 17,47±0,05 мкг/мг соответственно; в василистника траве – 17,47 ±0,05 мкг/мг и 13,41±0,04 мкг/мг, в василистника корнях – 27,12±0,45 мкг/мг и 22,16±0,12 мкг/мг соответственно. Впервые методом ВЭЖХ в прострела лугового траве было идентифицировано 9 соединений фенольной природы: 5 флавоноидов, 2 гидроксикоричные кислоты и 2 кумарина. Были определены количественно флавоноиды: рутин, гиперозида, апигенин-7-глюкозид, лютеолин и кверцетин, среди которых наибольшее содержание апигенин-7-глюкозида (1,091±0,06 мг/г), гиперозида (0,244±0,02 мг/г) и лютеолина (0,157±0,02 мг/г). Впервые методом ГХ/МС в сырье определено содержание свободных сахаров и суммы свободных и связанных сахаров с преобладанием последних. В василистника вонючего траве в наибольшем количестве содержатся ксилоза – 13,89±0,01 мг/г и глюкоза – 4,79±0,05 мг/г; в корнях василистника определено высокое содержание глюкозы (14,83±0,06 мг/г), ксилозы (6,92±0,11 мг/г) и арабинозы (4,57±0,1 мг/г) в свободном состоянии. Среди установленной суммы свободных и связанных сахаров в прострела лугового траве в наибольшем количестве содержатся ксилоза (13,89±0,05 мг/г), глюкоза (4,7±0,02мг/г), арабиноза (3,01±0,01 мг/г). Впервые методом ГХ/МС идентифицировано и определено количественное содержание жирных кислот: в прострела лугового траве – 13, в василистника вонючего траве – 8, в корнях – 10. В наибольшем количестве содержатся пальмитиновая, линоленовая, линолевая, лигноцериновая кислоты. Получены сухие экстракты белокудренника черного травы и василистника вонючего травы, для которых определены параметры стандартизации, изучены нейромедиаторное и антиоксидантное действия. Новизна диссертационных исследований подтверждена патентом Украины на полезную модель № 111636 "Лечебно-профилактическое средство с нейромедиаторным и антиоксидантным действием на основе растительного сырья". Получен прострела лугового травы экстракт жидкий, определены его параметры стандартизации и изучены седативное и снотворное действия. Новизна диссертационных исследований подтверждена патентом Украины на полезную модель № 110388 "Лечебно-профилактическое средство с седативным и снотворным действием на основе растительного сырья". Впервые разработана добавка диетическая комбинированного состава «Мемофит» (изменение № 7 к ТУ В 15.8-31062507-014: 2008 от 24.04.2017 г. "Добавка диетическая. Капсулы с растительными экстрактами серии "Защита сосудов"), определены ее параметры стандартизации, разработаны методики контроля, исследовано нейромедиаторное действие и острая токсичность. Технология получения «Мемофит» внедрена в промышленное производство в условиях ООО "Опытный завод "ГНЦЛС" на заказ ООО "Фармацевтическая фирма "Вертекс" (г. Харьков).

Pharmacognostic study of medicinal plants stinking meadow-rue (herb and root) and meadow pasqueflower (herb) was performed for the first time. Quality control methods for black ballota herb were tested in accordance with the requirements of SPhU and EP, that were used at the development of monograph SPhU 2.0 V.3 «Ballota nigra». The content of 15 macro- and microelements in the herb of meadow pasqueflower and in the herb and roots of stinking meadow-rue was determined by the atomic emission spectroscopy first. High level of glutamic and aspartic acid was found in all herbal raw material. Content of 15 macro- and microelements was found by atomic emission spectroscopy. 9 compounds of phenolic nature were identified in the meadow pasqueflower herb by HPLC for the first time: 5 flavonoids, 2 hydroxycinnamic acids and 2 coumarins. Free and general monosaccharides content was determined in the herb of meadow pasqueflower and in the herb and roots of stinking meadow-rue by GC/MS for the first time. Content of fatty acids was found for the first time too: in the herb of meadow pasqueflower – 13, in the meadow-rue herb – 8, in the roots of meadow-rue – 10. Formulation technology was developed to obtain dry extracts from the herb of black ballota and stinking meadow-rue, for which standartization parameters were determined and pharmacological action was investigated. Novelty of thesis research is proved by the useful model patent of Ukraine Dietary supplement «Memofit» of combined composition was developed first (manufacturer OOO «Pharmaceutical firm «Vertex», Kharkiv), standartization parameters were determined for this dietary supplement. Project of quality control methods was developed. Neurally mediated action and acute toxicity were investigated for this dietary supplement.