Screening of the antioxidant activity of extracts from Hedera helix leaves using the HPLC/ABTS method

Abstract

Hedera helix is widely used as a remedy to treat the respiratory infections and cold accompanied with cough due to its anti-inflammatory effect. In addition, the antioxidant activity of its extracts has been confirmed. It is explained by the high content of flavonoids and phenolic acids among all phytochemicals of H. helix leaves. However, it remains uncertain which exactly components are responsible for the antioxidant activity and what is the best way to perform extraction. Aim. To determine the antioxidant profile of different extracts from H. helix leaves using the in vitro HPLC method combined with the ABTS reagent. Materials and methods. Extraction of H. helix leaves was conducted with different solvents (from 20 % methanol to 100 % methanol using an ultrasound bath); the method described in the Pharmacopeia was also used. A Waters chromatograph was used to determine the antioxidant profile. Results. About 90 % of the components responsible for the antioxidant activity were determined using the HPLC method proposed. Among them, chlorogenic acid and 3,5-caffeoylquinic acid showed the highest activities. Other components, such as neochlorogenic acid, hyperoside and 3,4-caffeoylquinic acid were revealed as components with the antioxidant scavenging activities in H. helix lextracts. Conclusions. The results obtained indicate that extracts from H. helix leaves possess the high antioxidant scavenging capacity. In addition, the in vitro HPLC method proposed can be used for the primary screening of components in the plant raw material.

Hederahelix широко використовується для лікування респіраторних інфекцій та застуди, що супроводжується кашлем, завдяки протизапальним властивостям. Крім цього, була підтверджена антиоксидантна активність його екстрактів. Це пояснюється високим вмістом флавоноїдів та фенольних кислот серед фітохімічного про- філю листя плюща. Проте залишається незрозумілим, які саме речовини відповідають за антиоксидантну ак- тивність та яким чином краще проводити їх екстракцію. Мета дослідження. Визначити профіль антиоксидантів різних екстрактів листя плюща з використанням in vitro ВЕРХ методу, об’єднаного з ABTS реагентом. Матеріали та методи. Екстракцію листя плюща проводили за допомогою різних розчинників від 20 % до 100 % метанолу з використанням УЗ-бані, а також застосовували фармакопейний метод екстракції. Для визна- чення антиоксидантного профілю використовували хроматограф Waters. Результати. За допомогою запропонованого методу було визначено майже 90 % основних речовин, що відпо- відають за антиоксидантну активність. Серед них найбільшу активність мали хлорогенова кислота та 3,5-ко- феоїлохінова кислота. Також до речовин з антиоксидантною активністю в листі плюща можна віднести нео- хлорогенову кислоту, гіперозид, 3,4-кофеоїлохінову кислоту. Висновки. Отримані результати свідчать про високі антиоксидантні властивості екстрактів листя плюща. Крім того, запропонований in vitro ВЕРХ метод може використовуватися для попереднього скринінгу антиокси- дантної активності речовин у рослинній сировині.

Hederahelix широко применяется для лечения респираторных инфекций и простуды, что сопровождается каш- лем, благодаря своим противовоспалительным свойствам. Кроме того, антиоксидантная активность его экс- трактов была подтверждена. Это объясняется высоким содержанием флавоноидов и фенольных кислот среди фитохимического профиля листьев плюща. Однако остаётся непонятным, какие именно вещества отвечают за антиоксидантный эффект и каким образом лучше проводить их экстракцию. Цель исследования. Изучение профиля антиоксидантов различных экстрактов листьев плюща с использова- нием in vitro ВЭЖХ метода, объединенного с ABTS реагентом. Материалы и методы. Экстракцию листьев плюща проводили с помощью различных растворителей от 20 % до 100 % метанола с использованием ультразвуковой бани, а также применяли метод экстракции, описанный в фармакопее. Для определения антиоксидантного профиля использовали Waters хроматограф. Результаты. С помощью предлагаемого метода было определено почти 90 % веществ, отвечающих за анти- оксидантный эффект, среди которых наибольшую активность имели хлорогеновая кислота и 3,5-кофеоилхи- новая кислота. Также к веществам, которые обладают антиоксидантными свойствами, можно отнести неохло- рогеновую кислоту, гиперозид и 3,5-кофеоилхиновую кислоту. Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о высоких антиоксидантных свойствах экстрактов листьев плюща. Кроме того, предложенный in vitro ВЭЖХ метод может быть использован для предварительного скри- нинга веществ в растительном сырье.