Розробка умов ізолювання вортіоксетину з біологічних рідин

Abstract

Метою дослідження була розробка умов пробопідготовки біологічних рідин для використання у хіміко-токсикологічному аналізі новітнього антидепресанту вортіоксетину. Матеріали та методи. Дослідження проводили з модельними пробами крові та сечі, що містили вортіоксетин. Під час дослідження крові попередньо осаджували формені елементи додаванням 10 % розчину кислоти трихлорацетатної. Проводили екстракційне очищення гексаном за рН 1-2 та екстрагували препарат з біологічних рідин хлористим метиленом за рН 8-9. Отримані екстракти додатково піддавали ТШХ-очищенню. Визначення вортіоксетину в елюатах з хроматограм проводили УФ-спектрофотометричним методом. Результати та їх обговорення. Значення Rf вортіоксетину в рухомій фазі етилацетат-метанол-25 % розчин амонію гідроксиду (85 : 10 : 5) становило 0,77 ± 0,05. УФ-спектри елюатів з хроматограм мали максимуми світлопоглинання за довжин хвиль 229 ± 2 та 232 ± 2 нм та за характером світлопоглинання збігалися з УФспектром стандартного розчину вортіоксетину в метанолі. Кількісне визначення проводили за λmax232 нм за рівнянням калібрувального графіка y = (0,0172 ± 3 · 10-4)x + (0,027 ± 0,008). У розроблених умовах пробопідготовки з крові виділено 27 ± 1 % вортіоксетину, із сечі – 62 ± 2 % препарату. Висновки. Доведено ефективність пробопідготовки біологічних рідин методом рідинно-рідинної екстракції щодо новітнього антидепресанту вортіоксетину. Розроблені методики рекомендовано для використання у судовій та клінічній токсикології.

Aim. To develop the conditions for the sample preparation of biological fluids in order use them in the chemicaltoxicological analysis of the new antidepressant vortioxetine. Materials and methods. The studies were performed with model blood and urine samples spiked with vortioxetine. When examining the blood the formed blood elements were pre-precipitated by adding 10 % solution of trichloroacetic acid. The extraction purification was performed with hexane at pH 1-2, and the drug was extracted from the biological fluids with methylene chloride at pH 8-9. The extracts obtained were further subjected to TLC purification. Vortioxetine in eluates from chromatograms was determined by the UV-spectrophotometric method. Results and discussion. The Rf value of vortioxetine in the mobile phase of ethyl acetate-methanol-25 % ammonium hydroxide solution (85 : 10 : 5) was 0.77 ± 0.05. The UV spectra of the eluates from the chromatograms had absorption maxima at the wavelengths of 229 ± 2 and 232 ± 2 nm and matched with the UV spectrum of the standard solution of vortioxetine in methanol. The quantitative determination was performed at λmax232 nm by the equation of the calibration curve y = (0.0172 ± 3 · 10-4)x + (0.027 ± 0.008). Under the conditions of the sample preparation developed 27 ± 1 % of vortioxetine from the blood and 62 ± 2 % of the drug from the urine were isolated. Conclusions. The efficiency of the sample preparation of biological fluids by the method of liquid-liquid extraction in relation to the new antidepressant vortioxetine has been determined. The methods developed are recommended for use in forensic and clinical toxicology

Целью исследования была разработка условий пробоподготовки биологических жидкостей для использования в химико-токсикологическом анализе нового антидепрессанта вортиоксетина.Материалы и методы. Исследования проводились с модельными пробами крови и мочи, содержащими вортиоксетин. При исследовании крови предварительно осаждали форменные элементы добавлением 10 % раствора кислоты трихлорацетатной. Проводили экстракционную очистку гексаном при рН 1-2 и экстрагировали препарат из биологических жидкостей хлористым метиленом при рН 8-9. Полученные экстракты дополнительно подвергали ТСХ-очистке. Определение вортиоксетина в элюатах с хроматограмм проводили УФспектрофотометрическим методом. Результаты и их обсуждение. Значение Rf вортиоксетина в подвижной фазе этилацетат-метанол-25 % раствор аммония гидроксида (85 : 10 : 5) составило 0,77 ± 0,05. УФ-спектры элюатов с хроматограмм имели максимумы светопоглощения при длинах волн 229 ± 2 и 232 ± 2 нм и по характеру светопоглощения совпадали с УФ-спектром стандартного раствора вортиоксетина в метаноле. Количественное определение проводили при λmax 232 нм по уравнению калибровочного графика y = (0,0172 ± 3 · 10-4)x + (0,027 ± 0,008). В разработанных условиях пробоподготовки из крови выделено 27 ± 1 % вортиоксетина, из мочи – 62 ± 2 % препарата. Выводы. Установлена эффективность пробоподготовки биологических жидкостей методом жидкостножидкостной экстракции относительно нового антидепрессанта вортиоксетина. Разработанные методики рекомендованы для использования в судебной и клинической токсикологии.