Гіпоглікемічна та гіполіпідемічна дія екстракту підземних органів чорноголовника родовикового

Abstract

Дисертацію присвячено експериментальному обґрунтуванню доцільності вивчення гіпоглікемічних та гіполіпідемічних властивостей підземних органів чорноголовника родовикового. Результати проведеного дослідження підтверджують гіпоглікемічну активність відвару та екстракту чорноголовника родовикового, що встановлено в результаті їх одноразового введення. На експериментальних моделях з використанням надмірних доз глюкокортикоїдів та високожирової дієти встановлена здатність відвару чорноголовника родовикового нівелювати формування інсулінорезистентності та глюкозотолерантності у тварин. Гіполіпідемічні та антиоксидантні властивості екстракту чорноголовника родовикового виявлені за умов твінової гіперліпідемії та в експерименті in vitro відповідно. Застосування екстракту чорноголовника родовикового в якості антидіабетичного засобу, на моделях діабету 2 типу індукованих фруктозою та введенням стрептозотоцину і нікотинаміду, підтверджено завдяки поліпшенню параметрів вуглеводного, ліпідного обміну, а також відновленню антиоксидантної системи організму тварин.

Диссертация посвящена экспериментальному обоснованию целесообразности изучения гипогликемических и гиполипидемических свойств подземных органов черноголовника кровохлебкового. Качественный анализ сырья подземных органов черноголовника кровохлебкового показал присутствие тритерпеновых сапонинов, полисахаридов, полифенольных соединений и флавоноидов. Каждый из установленных классов соединений способен проявлять исследуемые нами фармакологические активности. Поэтому целесообразным было получить экстракт с максимальным содержанием экстрактивных веществ, которые проявляли бы мощное комплексное действие. Для этого была оценена зависимость количества сухого остатка экстрактов, изготовленных с использованием 50%, 70%, 90% и 96% концентрации спирто- водной смеси. Результаты анализа показали, что при применении 70% этилового спирта содержание сухого остатка наибольший (24,99 ± 0,09%), поэтому экстракт черноголовника изготавливали с использованием именно этой концентрации экстрагента. В выбранном образце экстракта концентрация основных действующих веществ составляла: полифенольные соединения – 1,93 ± 0,02%, флавоноиды – 0,18 ± 0,01% и тритерпеновые сапонины – 3,10 ± 0,07%. Микроскопия подземных органов показала беспучковое анатомическое строение с хорошо развитой перидермой и коровой паренхимой с большими крахмальными зернами. Наличие гипогликемической активности отвара и экстракта подземных органов черноголовника кровохлебкового было подтверждено в результате их однократного введения интактным крысам. На экспериментальных моделях с использованием избыточных доз глюкокортикоидов и высокожировой диеты установлена способность отвара черноголовника кровохлебкового нивелировать формирования инсулинорезистентности и глюкозотолерантности у животных. Также, установлена способность снижать накопление абдоминально-висцерального жира в условиях высокожировой нагрузки. Количество абдоминально- висцерального жира от массы животных составила 8,5% в контрольной группе, 1,7% в интактной группе и 1,2% в группе, получавшей отвар. Исследование острой токсичности экстракта черноголовника кровохлебкового позволило отнести его к IV классу токсичности. В результате проведеного поиска наиболее эффективной дозы экстракта, была выбрана доза 100 мг/кг. Гиполипидемическое действие экстракта черноголовника кровохлебкового исследовано в условиях использования твиновой гиперлипидемии. Была определена способность экстракта снижать уровень триглицеридов и общих липидов на уровне референс препарата, а уровень общего холестерина даже ниже (p<0,05). В эксперименте in vitro изучены антиоксидантные свойства экстракта черноголовника кровохлебкового. Рассчитанная антиоксидантная активность экстракта с использованием гомогената печени по уровню малонового диальдегида составила 39,8%, а по уровню окислительной модификации белка 42,5% (270 нм) и 56,5% (363 нм). Целесообразность применения экстракта черноголовника кровохлебкового в качестве противодиабетического средства подтверждена на моделях диабета 2 типа, индуцированных фруктозой и введеним стрептозотоцина с никотинамидом, улучшением параметров углеводного, липидного обмена, а также состоянием антиоксидантной системы организма животных. В условиях диабета индуцированного фруктозой, уровень глюкозы и площадь под гликемической кривой в результате проведенного орального теста толерантности к углеводам, под влиянием экстракта и метформина статистически не отличались. Благодаря лечению ЕЧР содержание гликогена в печени увеличился по сравнению с контрольной группой на 71,8%. Уровень ЛПВП животных, получавших ЕЧР был выше на 14,4%, чем у животных контрольной группы. Также, установлена достоверная разница индексов атерогенности, получавших ЕЧР, метформин и Арфазетин по сравнению со значениями контрольной группы, которые были на 29,7%, 32,3% и 37,5% соответственно меньше. Эффективность экстракта подтверждена снижением концентраций общего холестерина, триглицеридов и уменьшением значения индекса атерогенности (p<0,05). Об активации системы антиоксидантной защиты, при использовании экстракта, свидетельствуют достоверно увеличенные активности глутатионредуктазы, супероксиддисмутазы и каталазы, а также уменьшение продуктов перекисного окисления липидов (ТБК- активных продуктов). Эффективность экстракта черноголовника кровохлебкового, в условиях диабета 2 типа индуцированного стрептозотоцином и никотинамидом, не отличалась от таковой метформина. Коэффициент инсулинорезистентности и индекс атерогенности на 54,1% и 71,4% соответственно были меньшими по сравнению с контрольными показателями (p<0,01). В группе животных, получавших экстракт отмечалось увеличение содержания гликогена по сравнению с контрольными крысами на 41,2%, что свидетельствует о нормализации и улучшении процессов синтеза гликогена в печени. Улучшение параметров антиоксидантной системы под действием экстракта статистически не отличалось от такого влияния метформина. При микроскопии препарата ткани поджелудочной железы было установлено, что численность эндокриноцитов в панкреатических островках в большинстве экспериментальных животных под влиянием экстракта черноголовника была больше, чем у контрольной группы крыс.

The thesis is devoted to experimental study of hypoglycemic, lipid-lowering and antioxidant properties of Poterium sanguisorba L. underground part extract. Results of the study confirmed hypoglycemic activity of Poterium sanguisorba L. broth and extract that was established as a result of their single administration. Poterium sanguisorba L. broth reverse the formation of insulin resistance and glucose tolerance in experimental models using excessive doses of glucocorticoids and high fat diet. Lipidlowering and antioxidant properties of Poterium sanguisorba L. extract was found in terms of the twin hyperlipidemia and in vitro experiments, respectively. Application of Poterium sanguisorba L. extract as an antidiabetic agent confirmed improvement in parameters of carbohydrate, lipid metabolism and antioxidant system of animals in terms of fructoseinduced and streptozotocin- nicotinamide induced diabetes type 2.