Хроматографическое обнаружение глибенкламида в биологических объектах при моделировании комбинированных отравлений лекарственными веществами

Abstract

В статье отражены результаты хроматографического обнаружения глибенкламида методами ТСХ и ВЭЖХ в извлечениях, полученных из тканей печени при моделировании комбинированных отравлений с пиоглитазоном, симвастатином и фуросемидом. В соответствии с общепринятой методологией химико-токсикологического анализа изолирование данных токсикантов из биологического объекта проводили общим для лекарственных веществ методом Стаса-Отто. Хроматографирование стандартных образцов токсикантов и хлороформных экстрактов токсикантов, полученных из тканей печени, проводили в общих для лекарственных веществ кислотного характера системах растворителей, рекомендованных TIAFT. Установлено, что их хроматографическая подвижность находится в пределах Rf 0,03–0,74. Система хлороформ-циклогексан-ледяная уксусная кислота (40:40:20) определена как наиболее приемлемая. Осуществлен поиск проявителей зон адсорбции токсикантов в тонких слоях сорбента. В качестве наиболее специфического реагента предложен 1% раствор ванилина в H2SO4 конц., а наиболее чувствительного – железойодидный комплекс. При хроматографировании хлороформных экстрактов, полученных из печени, зону адсорбции фуросемида обнаружить не удалось. Предложены ВЭЖХ-условия для хроматографирования метанольных элюатов токсикантов, полученных из непроявленных реагентами их зон адсорбции в тонком слое. Время удерживания глибенкламида (tR = 9,88), пиоглитазона (tR = 5,03) и симвастатина (tR = 16,99) соответствовало времени удерживания их стандартных образцов. Таким образом, применение данных хроматографических условий позволяет идентифицировать исследуемые токсиканты при отравлении неизвестным веществом.

This article represents the results of the chromatographic detection of glibenclamide by TLC and HPLC methods in the extracts, obtained from the liver tissue, during modeling of combined poisoning with pioglitazone, simvastatin and furosemide. In accordance with the methodology of chemical-toxicological analysis the isolation of toxicants from biological object by general for drugs method Stas-Otto has been conducted. Chromatographing of the standard samples of toxicants and chloroform extracts of toxicants, obtained from liver tissue, in the general for drugs of acidic character mobile systems, which are recommended by TIAFT has been performed. It has been determined that their chromatographic mobility in the proposed conditions was in the range of Rf 0,03–0,74. The system chloroform-cyclohexane-glacial acetic acid (40:40:20) has been defined as the most acceptable. The search of the developers for the detection of adsorption zones of toxicants in thin layers has been held. As the most specific reagent 1% solution of vanillin in conc. sulfuric acid and most sensitive – ferric-iodine complex have been offered. Chromatographing of chloroform extracts, obtained from the liver tissue, for the detection of adsorption zones of furosemide in thin layers was impossible. The HPLC conditions for the chromatography of the methanol eluates of toxicants, obtained from the undeveloped by reagents adsorption area in a thin layer, have been proposed. The retention time of glibenclamide (tR = 9,88), pioglitazone (tR = 5,03) and simvastatin (tR = 16,99) matched with the retention time of standard samples. Thus, the application of these chromatographic conditions allows the identification of toxicants investigated for poisoning by nknown substance.