Розроблення та валідація методики визначення ступеня інкапсуляції цитохрому C у ліпосомах

Abstract

Перспективным направлением создания высокоэффективных лекарственных препаратов являются терапевтические системы направленного действия. Основой таких систем являются наночастицы различной структуры, которые способны обеспечивать нацеленность действия и увеличение биодоступности препаратов. Особое место в современных системах доставки лекарств занимают липосомальные наночастицы, которые обладают рядом несомненных преимуществ в сравнении с наночастицами другого типа. Разработка специфических методов контроля наноразмерных систем направленного действия является актуальной задачей фармации Цель работы – разработка и валидация методики определения степени инкапсуляции цитохрома С в липосомы. Объект исследования – полученная липосомальная форма цитохрома С, эмульсия плацебо липосом и раствор цитохрома С. Использовали метод высоэффективной жидкостной хроматографии. Исследо- 75 ISSN 0367-3057, Фармацевтичний журнал, 2016, № 5 вания проводили со всеми требованиями и рекомендациями ICH, FDA для разработки методов контроля липосомальных препаратов. Разработана ВЭЖХ-методика, позволяющая определять степень инкапсуляции цитохрома С в липосомальном препарате, а также проводить идентификацию состава липосомальных наночастиц цитохрома С. ВЭЖХ-методика валидирована по показателям «специфичность», «предел обнаружения» и «робасность» в соответствии с рекомендованными критериями. Методику можно использовать в контроле качества готовой липосомальной формы цитохрома С, а также в контрольных точках во время технологического процесса.

A strategic pathway in creating high-potent medical products is with targeted therapeutic systems that are based on nanoparticles of various structure. Such particles are capable of providing a targeted effect and an increase in bioavailability of the medical products. A special place among modern targeted drug delivery systems is held by liposomal nanoparticles which have apparent advantages over nanoparticles of an another type The problem number one for pharmacy lies in developing specific methods of control of nanosize drug delivery systems. This research is dedicated to the development and validation of a technique for determining encapsulation efficiency of cytochrome C in liposomes. The subject of research comprised the obtained liposomal form of cytochrome C, placebo emulsion, and cytochrome C solution. The research was conducted in compliance with the ICH and FDA requirements and recommendations in relation to the development of HPLC methods of control of liposomal preparations. A method has been developed to enable the determination of encapsulation efficiency of cytochrome C in liposomal preparations and to allow for identifying the composition of liposomal nanoparticles of cytochrome C. This HPLC method has been validated in terms of specificity, limit of detection, and robustness in compliance with the recommended criteria. The technique may find its application in quality control of liposomal form of cytochrome C and in control points manufacturing process.