Розробка та валідація методик контролю якості комбінованих мазей з тетрацикліном та гідрокортизоном

Abstract

Дисертація присвячена розробці та валідації методик кількісного визначення активних інгредієнтів комбінованих екстемпоральних мазей, виготовлених з використанням мазі гідрокортизонової 1 % та мазі тетрациклінової 3 % промислового виробництва. В дисертаційній роботі вперше розроблені та валідовані методики кількісного визначення гідрокортизону бутирату, тетрацикліну гідрохлориду, прокаїну гідрохлориду Верифіковані методики кількісного визначення прокаїну гідрохлориду, сульфаніламіду та нітрофуралу. Вперше проведені оцінка мікробіологічної чистоти досліджуваних мазей та вивчення їх реологічних параметрів. Оцінений вплив механічної обробки мазей в процесі приготування на збереження стабільності їх структурно-механічних властивостей. Шляхом вивчення реологічних параметрів мазей доведене збереження їх споживчих властивостей в процесі зберігання. З використанням розроблених та верифікованих методик кількісного визначення компонентів оцінена хімічна стабільність досліджуваних мазей та визначені рекомендовані терміни зберігання.

Диссертация посвящена разработке и валидации методик количественного определения активных ингредиентов комбинированных экстемпоральных мазей, приготовленых с использованием мази гидрокортизоновой 1 % и мази тетрациклиновой 3 % промышленного производства. В процессе анализа комбинированной мази с гидрокортизоном была проведена разработка методики его количественного определения. Для этого проанализированы несколько способов выделения гидрокортизона бутирата из мази: с помощью этанола 96 % (по рекомендации Фармакопеи Японии), по методике на неомыляемые вещества и с помощью этилацетата с последующим определением по реакции с кислотой серной. Но полученные результаты проведения анализа с использованием данных подходов к экстракции показали невозможность их использования в количественном определении гидрокортизона бутирата. После этого было решено использовать возможность образования окрашеных продуктов после взаимодействия гидрокортизона бутирата с растворами железа (III) хлорида и калия гексацианоферрата (III). Данная методика показала хорошие результаты линейности при определении количественного содержания гидрокортизона бутирата в субстанциии, но при исследовании специфичности методики от нее пришлось отказаться. Разработку методики количественного определения гидрокортизона бутирата проводили по его реакции с фенилгидразином за счет наличия в молекуле гидрокортизона бутирата кето-группы в положении 3. Полученные результаты валидации методики позволяют рекомендовать ее для анализа исследуемой мази. Количественное определение прокаина гидрохлорида в исследуемой экстемпоральной мази проводили методом абсорбционной спектрофотометрии в видимой области по образованию азокрасителя (максимум поглощения 513 нм). Нитрофурал определяли методом абсорбционной спектрофотометрии в видимой области (максимум поглощения 440 нм). Доказана возможность использования методик в анализе комбинированной мази. Определена микробиологическая чистота мази на протяжении месяца. Доказано соответствие требованиям статьи 5.1.4. “Микробиологическая чистота нестерильных лекарственных средств и субстанций для фармацевтического применения” ГФУ. Кроме этого, изучены реологические показатели мази. Доказано, что добавление субстанций прокаина гидрохлорида и нитрофурала оказывает незначительное влияние на структурно-механические свойства мази, которые сохраняют свою устойчивость в течении месяца. По результатам изучения химической стабильности мази установлен рекомендуемый срок ее годности на протяжении двадцати дней при хранении при температуре 5±3 0С. В процессе анализа комбинированной экстемпоральной мази, приготовленной с использованием мази тетрациклиновой 3 % промышленного производства осуществлена разработка методики количественного определения тетрациклина гидрохлорида после его выделения фосфатным буферным раствором. Изучены валидационные параметры методики по результатам исследований, полученным в двух лабораториях. Результаты изучения линейности, правильности, прецизионности и воспроизводимости методики свидетельствуют о возможности ее использования в анализе мази. Для количественного определения прокаина гидрохлорида был разработан метод спектрофотометрии. При его разработке изучена возможность образования окрашенных комплексов прокаина гидрохлрида с метиловым красным, тропеолином 00 и метиловым оранжевым. Наилучшие результаты были получены при использовании метилового оранжевого. Образующийся комплекс рекомендовано извлекать хлороформом. Поскольку присутствие тетрациклина гидрохлорида обуславливает окрашивание исследуемого раствора в желтый цвет, решено было проводить определение в присутствии спиртового раствора серной кислоты. Ее добавление позволяет изменить окраску на розовую и перенести максимум поглощения до 522 нм. Результаты статистической обработки и валидации полученных результатов свидетельствуют о возможности использования методики для количественного определения прокаина гидрохлорида в исследумой мази. Количественное определение сульфаниламида предложено проводить методом “Определение аминного азота в соединениях, которые содержат первичную ароматическую аминогруппу” с учетом объема титранта (натрия нитрита), израсходованного на титрование прокаина гидрохлорида. Изучена микробиологическая чистота мази на протяжении шести месяцев. Общее число жизнеспособных аэробных микроорганизмов (TAMC) на протяжении 180 дней хранения составило 40 КОЕ/г, общее число жизнеспособных дрожжевых и плесневых грибов (ТYMC) составило до 10 КОЕ/г. По результатам изучения реологических параметров установлено сохранение потребительских свойств мази на протяжении месяца. Изучена химическая стабильности мази методами долгосрочных и ускоренных испытаний стабильности. Доказано сохранение количественного содержания действующих компонентов мази и установлен предварительный срок годности мази – 30 дней при температуре 5±3 0С

The dissertation is devoted to the development and validation of quantitative determination methods of combined extemporal ointments active ingredients, made with using of hydrocortisone 1% ointment and tetracycline 3% ointment industrial production. In the dissertation work methods of hydrocortisone butyrate, tetracycline hydrochloride, procaine hydrochloride quantitative determination developed and validated for the first time. Methods for procaine hydrochloride, sulfanilamide and nitrofural quantitative determination were verifying. An estimation of microbiological purity of the studied ointments and studying of their rheological parameters has conducted for the first time. The influence of ointments mechanical processing during the process of preparation on the stability of their structural and mechanical properties has estimated. The preservation of their consumer properties in the process of storage has been prove by studying the rheological parameters of the ointments. Using the developed and verified methods of the components quantitative determination, the chemical stability of the studied ointments has evaluated and the recommended storage periods have determined.