Розробка методик контролю якості засобу противірусної дії «Імуно-вірал з вітаміном С»

Abstract

Вперше розроблено методики контролю якості твердої лікарської форми «Імуно-вірал з вітаміном С». Стандартизовано траву парила звичайного, траву пла­ку­на верболистого, траву гадючника в’язолистого, листя чаю китайського, шкірку пло­дів гранату та плоди анісу зірчастого. Розроблено та визначено валідаційні характеристики методик контролю якості сухих екстрактів. За допомогою методів тонкошарової хроматографії та спектрофотометрії ідентифіковано дубильні речовини та флавоноїди, визначено їх кількісний вміст. Розроблено методики контролю якості капсул «Імуно-вірал з вітаміном С». Доведена противірусна активність засобу «Імуно-вірал з вітаміном С». Розроблені прое­кти монографій Державної фармакопеї України «Парила трава» та «Плакуну трава».

Впервые проведено комплексное исследование по разработке методик контроля качества капсул «Иммуно-вирал с витамином С», промежуточных продуктов производства – сухих экстрактов (1:10 водных), лекарственного растительного сырья: репейничка аптечного, дербенника иволистого, лабазника вязолистного, чая китайского и аниса звёздчатого, которые входят в состав лекарственной формы, а также граната обыкновенного. Проведена стандартизация травы репейничка аптечного и травы дербенника иволистого, которые были заготовлены в период 2009-2010 года. Нами были проанализированы макро- и микроскопические признаки исследуемых видов сырья, а также числовые показатели. Методом ТСХ в траве репейничка аптечного были идентифицированы флавоноиды – рутин и изокверцитрин, а в траве дербенника иволистого – витексин, рутин, гиперозид, хлорогеновая кислота. В листьях чая китайского и кожуре плодов граната обыкновенного методом двумерной БХ были идентифицированы (±) катехин, (-) эпикатехин, (±) галлокатехин, (-) эпигаллокатехин, (-) эпикатехингаллат, (-) эпигаллокатехингаллат, (±) галлокатехингаллат, флавоноиды - рутин, кверцетин; хлорогеновая кислота. Содержание дубильных веществ составило 2,00-2,42% в траве репейничка аптечного и 5,00-5,68% в траве дербенника иволистого, что было определено с помощью методики спектрофотометрического определения (ДФУ 1.2. п. 2.8.14). Содержание дубильных веществ было определено также в листьях чая китайского, траве лабазника вязолистого, кожуре плодов граната и плодах аниса звёздчатого. Для осуществления входного контроля на производстве были разработаны методики количественного определения флавоноидов для всех видов исследуемого сырья методом абсорбционной спектрофотометрии в УФ- и видимой области. Расчет содержания флавоноидов рассчитывали по методу стандарта с использованием фармакопейного стандартного образца (ФСО) рутина. Все расчеты проводили в пересчете на доминирующее вещество, которое принимали за стандарт. Для предложенной методики количественного определения были определены некоторые валидационные параметры: показатели линейной зависимости, стабильность и сходимость аналитического раствора. Полученные результаты свидетельствуют о выполнении требований к параметрам линейной зависимости: линейность методики подтверждается на всём исследованном диапазоне концентраций. Систематическая погрешность и относительное стандартное отклонение не превышают относительный доверительный интервал и критическое значение для сходимости результатов, что свидетельствует о корректности методики. Для получения сухих экстрактов и разработки состава твёрдой лекарственной формы на их основе были изучены технологические параметры сырья. На основе полученных экспериментальных данных были выбраны и обоснованы оптимальные значения показателей для каждого из исследуемых видов растительного сырья. Разработаны методики идентификации и количественного определения дубильных веществ и флавоноидов в экстрактах. Для контроля качества экстрактов в условиях производства предложены методики идентификации дубильных веществ и флавоноидов методом тонкослойной хроматографии, для количественного определения выбранных маркеров были разработаны методики абсорбционной спектрофотометрии. В ходе проведенных исследований были предложены параметры стандартизации исследуемых промежуточных продуктов производства - сухих экстрактов. Для идентификации дубильных веществ и флавоноидов в капсулах «Иммуно-вирал с витамином С» был предложен метод тонкослойной хроматографии, а для количественного определения этих веществ - методика спектрофотометрического определения в видимой области. В результате проведенных исследований было осуществлено нормирование содержания флавоноидов и дубильных веществ в капсулах «Иммуно-вирал с витамином С» – 0,007 г и 0,010 г на 1 капсулу соответственно. Корректность разработанных методик подтверждалась валидационными характеристиками. Доказана противовирусная активность твёрдой лекарственной формы – капсул «Иммуно-вирал с витамином С» относительно прототипного штамма вируса гриппа А/Виктория. Разработаны проекты монографий ГФУ «Репейничка трава» и «Дербенника трава».

A complex research of development of methods of the quality control of the remedy «Immuno-viral with vitamin C» was carried out for the first time. Standardization of the herb of Agrimony eupatoria, of the herb Lythrum salicaria, of the herb Filipendula ulmaria maxim., of the leaves of Chinese tea, peel Рomegranate and fruit of Illicium verum. Methods of the quality control of the dry extracts were developed and their validation characteristics were studied: identification and assay of the tannins and flavonoids was carried out by the method of TLC and spectrophotometry accordingly. Methods of quality control of the solid dosage forms - capsules "Immuno-viral with vitamin C" were developed. The antiviral activity of remedy "Immuno-viral with vitamin C" was proved. The project of the monographs of the State Pharmacopoeia of Ukraine "Agrimoniae herba" and "Lythri herba" were developed.