Фармакогностичне дослідження cтевії (Stevia rebaudiana Bertoni) та якону (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.)

Abstract

Вперше проведено комплексне фармакогностичне дослідження листків і кореневих бульб якону (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.) та листків стевії (Stevia rebaudiana Bertoni). Встановлено, що досліджувані об’єкти містять амінокислоти, вуглеводи, кислоти жирні та органічні, в тому числі аскорбінову, леткі сполуки, речовини фенольної природи (кислоти гідроксикоричні, флавоноїди, таніни, поліфеноли, кумарини), макро- і мікроелементи. У листках, кореневих бульбах і корі кореневих бульб якона ідентифіковано інулін, методом газо-рідинної хромато-мас-спектрометрії визначено його кількісний вміст, спектрофотометричним методом в даних об’єктах визначено кількісний вміст фруктанів. Вперше проведено системне морфолого-анатомічне дослідження листків і кореневих бульб якона та листків стевії, встановлено їх макро- і мікродіагостичні ознаки. Розроблено проекти МКЯ на нову лікарську рослинну сировину «Якона листки», «Якона кореневі бульби» і «Стевії листки». Одержано субстанції – густий екстракт з кореневих бульб якона, сухий екстракт з листків стевії та комбінований густий екстракт якона і стевії, фармакологічні дослідження яких показали наявність у них гіпоглікемічної активності. Визначено гостру токсичність густого комбінованого екстракту якона і стевії, встановлено, що він належить за класифікацією К. К. Сидорова до V класу токсичності – практично нетоксичні речовин (LD50 > 5000 мг/кг). Гістоморфологічними дослідженнями підтверджена панкреатозахисна активність досліджуваних екстрактів. Розроблено проект методів контролю якості «Якона і стевії комбінований екстракт густий».

Впервые проведено комплексное фармакогностическое исследование листьев и корневых клубней якона (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.) и листьев стевии (Stevia rebaudiana Bertoni). В исследуемом сырье установлен качественный состав и определено количественное содержание аминокислот, углеводов, кислот органических, в том числе аскорбиновой, липофильных соединений, жирных кислот, летучих соединений, фенольных веществ (кислот гидроксикоричных, флавоноидов, танинов, полифенолов, кумаринов), макро- и микроэлементов. В листьях и корневых клубнях якона идентифицирован инулин и определено количественное содержание фруктанов. Методом ТСХ в листья якона установлено наличие лимонной, винной янтарной кислот, в корневых клубнях якона – лимонной и янтарной; в листьях стевии – яблочной, лимонной и янтарной. В листьях и корневых клубнях якона, в листьях стевии определено количественное содержание свободных кислот органических и аскорбиновой: 5,80 %, 4,15 % и 4,95 %; 0,19 %, 0,08 % и 0,17 %, соответственно. Cпектрофотометрическим методом в листьях и корневых клубнях якона, в листьях стевии определено количественное содержание веществ фенольной природы: суммы фенольных соединений (в пересчете на кислоту галловую) – листья якона 6,75 %, корневые клубни якона 0,95 %, листья стевии 2,38 %; суммы гидроксикоричных кислот – листья якона 2,15 %, корневые клубни якона 1,54 %, листья стевии 6,67 %; суммы флавоноидов – листья якона 2,66 %, корневые клубни якона 0,32 %, листья стевии 1,23 %; танины – листья якона 0,68 %, корневые клубни якона 1,77 %, листья стевии 0,78 %; полифенолы (в пересчете на пирогаллол) – листья якона 7,22 %, корневые клубни якона 7,71 %, листья стевии 5,38 %. Методом ВЭЖХ в листьях якона и стевии обнаружено, идентифицировано и установлено количественное содержание компонентов дубильных веществ (кислоты галловой и эллаговой, эпигаллокатехина, галлокатехина, эпикатехина, эпикатехин галлата), кислот гидроксикоричных (хлорогеновой и розмариновой), флавоноидов (рутина, изокверцитрина, апигенина, лютеолина, кемпферола). В листьях якона также обнаружен катехин, кверцетин, кофейная и феруловая кислоты, кумарины – умбелиферон, скополетин и кумарин. Исследованы полисахаридные комплексы листьев, корневых клубней якона, коры корневых клубней якона и листьев стевии, выделены фракции водорастворимых полисахаридов и пектиновых веществ, количественное содержание которых составляло: ВРПС – листья якона – 5,13 %, корневые клубни якона – 10,74 %, кора корневых клубней якона – 12,45 %, листья стевии – 12,34 %; ПР – листья якона – 8,64 %, корневые клубни якона – 5,68 %, кора корневых клубней якона – 4,20 %, листья стевии – 7,12 %. Методом ГХ/МС в листьях якона выявлено 10 сахаров, главными из которых являются D-глюкоза, D-галактоза, D-фруктоза и сахароза; в корневых клубнях и в коре корневых клубней выявлено 7 и 13 сахаров, основными являются D-глюкоза, D-фруктоза и сахароза, соответственно. В листьях стевии идентифицировано 17 сахаров, среди которых наибольшее количество фруктозы (38,82 мг/кг) и незначительное количество сахарозы (5,16 мг/кг). В клубнях якона, коре клубней якона и листьях идентифицирован инулин. Методом ГХ/МС в них определено его количественное содержание – 46,28 мг/г, 47,17 мг/г и 10,67 мг/г, соответственно. Спектрофотометрическим методом определено содержание фруктанов в исследуемом сырье якона, содержание которых составляло: листья якона – 31,50 %, корневые клубни якона – 51,01 %, кора корневых клубней якона – 61,18 %. Установлен аминокислотный состав якона и стевии. В листьях якона идентифицировано 17 связанных аминокислот, свободных – 11; в корневых клубнях – по 12 свободных и связанных аминокислот. В листьях стевии выявлено 17 связанных и 14 свободных аминокислот. Методом хромато-масс-спектрометрии определен компонентный состав летучих веществ листьев, корневых клубней якона и листьев стевии; идентифицировано – 34, 16 и 22 компонента, соответственно. Определен качественный состав и количественное содержание кислот жирных в липофильных фракциях исследуемого растения. Отмечено преобладание ненасыщенных жирных кислот. Исследован элементный состав исследуемых органов якона и стевии. Установлено, что в значительном количестве накапливаются макроэлементы: кальций и фосфор в листьях якона, калий – в корневых клубнях, натрий – в листьях стевии. Впервые проведено системное морфолого-анатомическое исследование листьев и корневых клубней якона и листьев стевии, установлены их макро- и микродиагностические признаки. Получены субстанции – густой экстракт из корневых клубней якона, сухой экстракт из листьев стевии и комбинированный густой экстракт якона и стевии, фармакологические исследования которых показали наличие в них гипогликемической активности. Гистоморфологическими исследованиями подтверждена панкреазащитная активность исследуемых экстрактов. Установлено безопасность комбинорованного экстракта: по исследованиям острой токсичности он отнесен к V классу токсичности по классификации К. К. Сидорова (практически нетоксичные вещества – ЛД50 ≥ 5000 мг/кг). Разработан проект методов контроля качества «Якона и стевии комбинированный экстракт густой».

A comprehensive pharmacognostic study of leaves and yacon bulbi (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.) and stevia leaves (Stevia rebaudiana Bertoni) has been studied for the first time. It was found that the investigated objects contain amino acids, carbohydrates, fatty and organic acids, including ascorbic, volatile compounds, substances of phenolic nature (hydroxycoric acids, flavonoids, tannins, polyphenols, coumarins), macro and microelements. The inulin has been identified in the leaves, root tubers and the bark of root tubers of yacon, its quantitative content has been determined by the method of gas-liquid chromatographic mass spectrometry, and the quantitative content of the fructans is determined by the spectrophotometric method in these objects. Systematic morphological and anatomical study of leaves and root tubers of yacon and leaves of stevia has been conducted for the first time; their macro- and microdiagnostic features has been established. The projects of Quality Control Technique on new medicinal plant raw materials of Yacon leaves, Yacon root tubers and Stevia leaves have been developed. The optimum technology for obtaining substances is developed: a dense extract from the root tuber of yacon, a dry extract from the leaves of stevia and a combined thick extract of yacon and stevia. Pharmacological studies of the dense extract from the root tuber of yacon, the dry extract from the leaves of stevia and the dense combined extract of yacon and stevia have shown the presence of hypoglycemic activity in them. Acute toxicity of the dense combined extract of yacon and stevia has been determined, it has been established that it belongs to the classification of K. K. Sydorov to the class V toxicity – practically nontoxic substances (LD50> 5000 mg / kg). Histomorphological studies have confirmed the pancreatic protective activity of the investigated extracts. The project of methods of quality control of Yacon and Stevia Combined Dense Extract is developed.