Експериментальне вивчення гастропротекторної дії густого екстракту з незрілих плодів горіха волоського (Juglans regia L.)

Abstract

Дисертаційна робота присвячена аналізу гастропротекторної активності густого водно-спиртового (30% спирт етиловий) екстракту з незрілих плодів горіха волоського (ЕГВС 30). На першому етапі було отримано чотири екстракти з незрілих плодів горіха волоського (водний та водно-спиртові 30, 70 та 96%) та досліджено сучасними фізико-хімічними методами їх якісний та кількісний склад. Шляхом скринінгу було обрано найбільш ефективний за противиразковою активністю екстракт з незрілих плодів горіха волоського, яким виявився ЕГВС 30, та визначено його умовно-терапевтичну дозу. В експерименті виявлено гастропротекторні властивості ЕГВС 30 в дозі 25 мг/кг. В умовах спирто-преднізолонового, індометацинового та диклофенакового виразкового ураження шлунку ЕГВС 30 виявляє гастропротекторну дію, а саме достовірно знижує виразність виразкової деструкції та глибину ураження СОШ та нормалізує біохімічні показники плазми крові тварин. ЕГВС 30 має протизапальні властивості – гальмує розвиток карагенінового та формалінового набряків. ЕГВС 30 чинить антимікробну дію відносно музейних і клінічних штамів мікроорганізмів та виявляє гепатопротекторні властивості. Данні токсикологічних досліджень доводять безпечність ЕГВС 30. Результати дослідження експериментально обґрунтовують доцільність створення нового гастропротекторного препарату на основі ЕГВС 30.

Диссертация посвящена анализу гастропротекторной активности густого водно-спиртового (30% спирт этиловый) экстракта из незрелых плодов ореха грецкого (ЕГВС 30). На первом этапе было получено четыре экстракта из незрелых плодов ореха грецкого (водный и водно-спиртовые 30, 70 и 96%) и исследован их качественный и количественный состав современными физико-химическими методами. Путем скрининга был выбран наиболее эффективный, по противоязвенной активности, экстракт из незрелых плодов ореха грецкого, которым оказался ЕГВС 30, и определена его условно-терапевтическая доза. В эксперименте выявлены гастропротекторные свойства ЕГВС 30 в дозе 25 мг/кг. В условиях спирто-преднизолонового, индометацинового и диклофенакового язвенного повреждения желудка ЕГВС 30 выявляет гастропротекторное действие, а именно достоверно снижает выраженность язвенной деструкции и глубину поражения СОЖ и нормализирует биохимические показатели плазмы крови животных. ЕГВС 30 обладает противовоспалительными свойствами - тормозит развитие карагенинового и формалинового отеков. ЕГВС 30 оказывает антимикробное действие в отношении музейных и клинических штаммов микроорганизмов и проявляет гепатопротекторную активность. Данные токсикологических исследований доказывают безопасность ЕГВС 30. Результаты исследования экспериментально обосновывают целесообразность создания нового гастропротекторного препарата на основе ЕГВС 30.

The dissertation is concerned with the new solution of the actual scientific problem, which is determined by the experimental and theoretical substantiation of the efficiency of application of a dense hydroalcoholic (30 % ethyl alcohol) extract from crude walnut (Juglans regia L.) fruit in the complex pharmacotherapy of ulcerous stomach lesions of different etiologies. The investigated hydroalcoholic extract (30 % ethyl alcohol) from crude walnut fruit (DEHA 30) is selected as the leading extract among the extracts from crude fruits of Juglans regia (JR) for anti-ulcer activity as a result of screening studies. The investigated extracts from crude JR fruit were obtained at the Department of Quality, Standardization and Certification of Drugs of the National University of Pharmacy for guidance of Ph.D. Prokopenko Yu. S. The extracts have the appearance of dense masses of yellow-brown color with a specific odor of naproquinones, sweet to taste, are soluble in hydrophilic solvents and alcohols. As a result of screening studies on the model of acute alcohol-prednisolone stomach ulcer in rats it was found that the hydroalcoholic extract (30 % ethyl alcohol) from crude walnut fruit has the highest anti-ulcer activity at doses of 25 mg/kg (89.6 %) which is inferior (p<0,05) to the activity of the reference drug Altan (65.4 %). The next stage in the study of DEHA 30 as an anti-ulcer medicine was the determination of the conditionally effective dose for anti-ulcer activity in the model of acute alcohol-prednisolone stomach ulcer in rats, which made up 25 mg/kg for anti-ulcer activity, in which the extract reduces the secretory function of the stomach by 26.4 % (p<0,05). Subsequently, the efficacy of DEHA 30 in a conditionally effective dose of 25 mg/kg in different administration modes was investigated. On the model of alcohol-prednisolone ulcerative lesion of the stomach was established the expressive anti-ulcer activity of DEHA 30 at a dose of 25 mg/kg for prophylactic, therapeutic and therapeutic and prophylactic modes, at 79.2, 83.3 and 89.7 % (p<0,05), respectively, which corresponds to the activity of the Altan (62.5; 68.0; 74.4 %). The maximum efficacy of DEHA 30 at a dose of 25 mg/kg was established in the treatment-prophylactic mode of administration, which was confirmed by the results of macroscopic and microscopic studies of the gastric mucosa and on the parameters of prooxidant-antioxidant balance, cytolysis activity and protein-synthetic processes. Histologically, a decrease in the number and depth of defects, hemocapillary disorders, edema of the mucous membrane of the stomach was established. The gastroprotective activity of the test extract on models of NSAID-induced gastric ulcers: indomethacin (20 mg/kg intragastric once) and diclofenac (50 mg/kg intragastric fractional introduction) were investigated. The anti-ulcerative effect of DEHA 30 at a dose of 25 mg/kg in the therapeutic and prophylactic mode of administration has been established at the level of 86.1 % (p<0.05) on indomethacin-induced and at 76.7 % (p<0.05) on diclofenac-induced gastropathy, which comparable to the effect of the reference drug Altan (75.7, 56.0%) (p<0.05). An important component of the manifestation of gastroprotective action is anti-inflammatory activity. The anti-inflammatory activity of DEHA 30 in the conditionally effective dose in the aseptic edema models was established: at 37.3 % (p<0.05) with a maximum of 120 minutes on the carrageenan edema model and at 30.3 % (p<0.05) with a maximum of 180 minutes on the model of formalin edema, which is inferior to the drug for comparison – diclofenac sodium (47.1, 43.1 %). Antimicrobial activity of DEHA 30: at 50 μg/ml it inhibits the growth of strains of test cultures: Shigella flexneri 1a No. 8516, Shigella sonnei 2K colicynotype 1, at 25 μg/ml inhibits Campylobacter jejuni № 108 growth and weakly inhibits the growth of Shigella flexneri 1a No. 8516 and Shigella sonnei 2K colicynotype 1. Hepatoprotective activity of DEHA 30 was detected on the model of medicinal lesion of the liver with paracetamol (increasing the content of RG by 1.7 times and decreasing TBA-R by 1.4 times and and ALT activity on 38.0 % (p<0.05). Experimental studies which carried out show that there is no specific sensitivity and toxic effect of dense extracts (aqueous and hydroalcoholic 30, 70 and 96 %) from crude JR fruit with single intragastric administration to mice and rats at a dose of 5000 mg/kg. According to the classification of Sidorov K. K. (1983) dense extracts of crude walnut fruit can be attributed to the class V – particularly non-toxic substances. Chronic administration (90 days) of DEHA 30 at a dose of 25 mg/kg in rats did not cause death of animals, did not have a toxic effect on their general condition, behavioral reactions, biochemical and hematological data.