Фармакологічне дослідження простатопротекторної дії супозиторіїв комбінованого складу

Abstract

Дисертаційна робота присвячена комплексному фармакологічному вивченню простатопротекторної активності супозиторіїв комбінованого складу з індол-3- карбінолом та мелоксикамом (СКС). СКС проявляють простатопротекторну дію шляхом нормалізації відносної маси передміхурової залози, покращення гістоструктури, а також суттєвого зменшення патологічних змін у залозі на клітинному рівні з нормалізацією активності 5α редуктази та вмісту рецепторів статевих гормонів, рецепторів андрогенів та рецепторів естрогенів, що підтверджено на моделях сульпірид- та тестостерон індукованої гіперплазії передміхурової залози. Корекція патологічних змін у щурів з індукованою гіперплазією простати різного ґенезу при застосуванні СКС відбувається завдяки специфічній здатності індол-3-карбінола знижувати активність 5α-редуктази, відповідальної за утворення індуктора гіперплазії передміхурової залози – дигідротестостерону, зменшувати концентрацію рецепторів андрогенів та естрогенів та співвідношення між цими рецепторами. Не виявлено гонадотоксичного ефекту при застосуванні СКС у тварин з індукованою сульпіридом гіперплазією простати, про що свідчить відсутність ознак органічних змін у гістологічній будові тканин сім’яників, позитивний вплив на масові коефіцієнти статевих залоз, концентрацію фруктози в сім’яних пухирцях, активність фосфатаз, гормональну функцію сім’яників (збільшення концентрації тестостерону та естрадіолу) з поліпшенням перебігу сперматогенезу за кількісними та якісними параметрами спермограми (зменшення частки патологічних та нерухомих гамет). Наявність токсичного впливу на інші органи та системи при дослідженні гострої токсичності СКС при ректальному та пероральному введенні у максимально можливій дозі не виявлена. СКС за виразністю простатопротекторної дії на різних моделях гіперплазії передміхурової залози різного ґенезу переважають препарат порівняння (супозиторії з олією насіння гарбуза).

Диссертация посвящена комплексному фармакологическому изучению простатопротекторной активности суппозиториев комбинированного состава с индол-3- карбинолом и мелоксикамом (СКС). СКС проявляют простатопротекторное действие путем нормализации относительной массы предстательной железы, улучшения гистоструктуры, а также существенного уменьшения патологических изменений в железе на клеточном уровне с нормализацией активности 5α-редуктазы и содержания рецепторов половых гормонов, рецепторов андрогенов и рецепторов эстрогенов, что подтверждено на моделях сульпирид- и тестостерон индуцированной гиперплазии предстательной железы. Коррекция патологических изменений у крыс с индуцированной гиперплазией простаты различного генеза при применении СКС происходит благодаря специфической способности индол-3-карбинол снижать активность 5α-редуктазы, ответственной за образование индуктора гиперплазии предстательной железы дигидротестостерона, уменьшать концентрацию рецепторов андрогенов и эстрогенов и соотношение между этими рецепторами. Не выявлено гонадотоксического эффекта при применении СКС у животных со сульпирид-индуцированной гиперплазией простаты, о чем свидетельствует отсутствие признаков органических изменений в гистологическом строении тканей семенников, положительное влияние на массовые коэффициенты половых желез, концентрацию фруктозы в семенных пузырьках, активность фосфатаз, гормональную функцию семенников (увеличение концентрации тестостерона и эстрадиола) с улучшением течения сперматогенеза по количественным и качественным параметрам спермограммы (уменьшение доли патологических и неподвижных гамет). Наличие токсического воздействия на другие органы и системы при исследовании острой токсичности СКС при ректальном и пероральном введении не выявлено. СКС по выраженности простатопротекторного действия на различных моделях гиперплазии предстательной железы различного генеза преобладают препарат сравнения (суппозитории с маслом семян тыквы).

Dissertation dedicated to the complex pharmacological study prostatoprotective action of combined composition suppositories with indole-3-carbinol and meloxicam. In rats with prostatic hyperplasia due to the development of hyperprolactinemia induced by the introduction of sulpiride, an increase in iron mass (approximately 30%) was detected. Light-optical studies of the sections of the gland showed clear signs of focal hyperplasia of the prostatic and duct epithelium with inflammatory processes in the stroma. There was a twofold decrease in androgenization of the organism with a decrease in the concentration of fructose (by 43.7 %), impaired spermatogenesis (a decrease in the concentration of spermatozoa by 31.2%, among which almost doubled the proportion of abnormal forms), changes in acid-base balance of suspension, gonadotoxic effects on the morphostructure of the testes. The enzyme-linked immunosorbent assay established hormonal balance disorders. Thus, the concentration of total testosterone and its free form decreased statistically significantly (by 44.8 and 11.7%, respectively). The E2 concentration was only 15.8 % of the control level. Significant prostate disorders were detected at the cellular level using the ELISA method. Thus, the activity of 5α reductase (p <0.05) increased by 2.5 times, the content of ER and AR in the PC homogenate significantly increased (p <0.05). A significant, statistically probable decrease in the Т / AR and E / ER ratio was found in the prostatic tissue, which corresponds to the detected decrease in the concentration of sex hormones. Increasing AR / ER ratio indicates impaired intracellular metabolism of testosterone, in particular, in the path of its aromatization. That is, the data obtained indicate the development of a number of functional, morphological and biochemical disorders of the gland in a state of benign hyperplasia. The use of CCS normalized the relative mass of the prostatic gland, markedly reduced the manifestations of epithelial hyperplasia, restored the orderliness of single-layered epithelial cells in the epithelial lining of the prostatic glands and excretory ducts, prevented the inflammatory process in the stroma. Marked improvement androgen status of the organism: massive growth factors gonads, the level of fructose in the seminal vesicles (45%), normalization of activity of phosphatases, improving quality indicators gametes (the reduction of percentage of immotile and abnormal sperm) and shift of acid-base balance epidydimal cells suspension in the acidic side, which corresponds to the physiological state of the system, as well as the absence of gonadotoxic effect in the optical analysis of histological preparations of the testes. These results were consistent with the ELISA method of the concentration of sex hormones in the blood, which showed a complete restoration of testosterone levels, its free androgen fraction and estradiol to control values. The use of CCS in rats with sulpiride induced prostate hyperplasia significantly reduces pathological changes in the gland at the cellular level. There was a significant decrease in the activity of 5α-reductase, the content of sex hormone androgen receptors, although the content of estrogen receptors increased by almost 6 times and the E2 / ER ratio decreased. CCS suppositories by the severity of prostatotrophic action in this experimental model are to some extent dominated by the preparation of the comparison of suppositories with pumpkin seed oil, and their activity at the cellular level is the result of the specific corrective activity of the component of CCS – indole-3-carbinol. Another experimental model of pathology was chosen testosterone-induced prostate hyperplasia. Daily subcutaneous administration of testosterone propionate to castrated male rats was accompanied by the following changes: an almost twofold increase in testosterone concentration, a 13.4- fold increase in free testosterone concentration, an 84 % decrease in estradiol concentration. It is also marked by an increase in the relative mass of the prostate and seminal vesicles, a decrease in the activity of acid and a violation of the ratio of activity of acid and alkaline phosphatases. Androgenic stimulation caused in castrated rats a distinct hypertrophy of the prostatic glands of all prostate glands with signs of glandular epithelial hyperplasia, with a partial change in the type of secretion in the acini, corresponding to signs of benign prostatic hyperplasia. Separately observed for changes in gland at the cellular level, which are in increasing 5α-reductase activity (2.3 times), estrogen receptor concentration (3.5 times), androgen receptors concentration (34 times) and AR/ER ratio (7.6 times) in prostate gland homogenate compared to the Intact group. These results demonstrate changes that are directly responsible for the development of prostate hyperplasia. Correction with the help of the proposed CCS reduced the relative mass of the gland and morphological features of the pathology, in particular, hypertrophy of the acini of prostatic glands, minimization of the manifestations of hyperplasia of the glandular epithelium, normalization of phosphatase activity was observed. The effect of correction therapy with CCS was to reduce the concentration of all hormones: total T, the absolute amount and proportion of free T and E2 in comparison with the data of model pathology. According to these results, the CCS suppositories were dominated by the effect of the reference drug with pumpkin seed oil. The decrease in the activity of 5α-reductase (34.4 %) and the content of androgen receptors (76.0 %), in our opinion, is the result of the specific corrective activity of indole-3-carbinol. By the effect of a positive effect on the morphological manifestations of testosterone propionate induced prostate hyperplasia, metabolic indicators and integral indicators of cellular changes of the prostate gland, suppositories of the combined composition are dominated by the comparator –suppositories with pumpkin seed oil. The use of these models of pathology made it possible to evaluate qualitatively the mechanism of action of suppositories of the combined composition. The results of the study confirm the presence of hormone-modulating activity and the positive effect of the proposed the CCS suppositories on the important pathogenetic links of prostatic hyperplasia. The successful combination of pharmacological and technological properties of CCS suppositories with I3C meets current requirements for the medicinal products of this therapeutic group.