Експериментальне обгрунтування корекції колоїдно-гіперосмолярним розчином HAES-LX 5% функціонального стану легень в умовах опікового шоку

Abstract

Дисертація присвячена доклінічному вивченню лікувальної дії нового колоїдно-гіперосмолярного розчину (КГР) HAES-LX 5% у порівнянні з референспрепаратом лактопротеїн з сорбітолом (ЛПС) при порушенні гомеостазу організму та пошкодженні легень щурів в умовах опікового шоку (ОШ), спричиненого опіковою травмою. Було досліджено вплив розчину НАЕS-LX 5% на динаміку показників виживаності, маси тіла, системної запальної реакції та ендогенної інтоксикації, оксидативного, нітрозативного та сульфідного стресу, дисбалансу про- та антиоксидантних систем на системному та органному рівнях, фосфоліпідного спектру клітинних мембран, маркерів деструкції та фіброгенезу, показників клітинного циклу та фрагментації ДНК клітин легень, на морфота ультраструктуру легень. За результатами дослідження встановлено, що розчин НАЕS-LX 5% виявляє протизапальний, антитоксичний, антиоксидантний, мембраностабілізувальний, антифіброгенний, антиапоптотичний, цитопротекторний та пульмопротекторний ефекти та сприяє нормалізації порушених метаболічних процесів у організмі та тканинах легень щурів в умовах ОШ. Отримані результати обґрунтовують доцільність застосування досліджуваного препарату в клінічній практиці при лікуванні опікового шоку.

Диссертация посвящена доклиническому изучению лечебных свойств нового коллоидно-гиперосмолярного раствора (КГР) HAES-LX 5% при нарушении гомеостаза организма крыс и повреждении легких в условиях ожогового шока (ОШ), вызванного експериментальной ожоговой травмой. В работе были использованы методы исследования: фармакологические (оценка эффективности и безопасности КГР HAES-LX 5% и лактопротеина с сорбитолом (ЛПС)); биохимические (определение маркеров нарушения гомеостаза организма и тканей легких крыс в условиях ОШ); гистоморфологические, электронно- микроскопические, морфометрические (оценка патоморфологических признаков повреждения в легких крыс при ОШ в динамике и на фоне фармакотерапии инфузионными растворами); цитофлюорометрические (оценка процессов жизнеспособности клеток легких и апоптоза в динамике и на фоне фармакотерапии); статистические (параметрические за критерием Стьюдента и непараметрические методы анализа за U-критерием Мана-Уитни). Впервые было исследовано фармакодинамическое влияние КГР НАЕSLX 5% в сравнении с референс-препаратом ЛПС на функциональное состояние легких крыс в условиях ОШ. Експериментально доказано наличие пульмопротекторного действия у КГР НАЕS-LX 5% в условиях ОШ и отсутствие его токсического влияния на состояние легких у животных без патологии на органном, клеточном и субклеточном уровнях. Доказано, что исследуемый КГР HAES-LX 5% проявляет противовоспалительную активность, уменьшает уровень эндогенной интоксикации, предупреждает развитие системного оксидативного, нитрозативного и сульфидного стресса, сдерживает развитие дисбаланса в про- и антиоксидантной системе, уменьшает активность ПОЛ и белков и предотвращает активацию фиброгенеза в легочной ткани, улучшая общетрофические процессы в организме и тканях легких крыс с ОШ. Было проведено патоморфологическое обоснование безопасности растворов НАЕS-LX 5% и ЛПС у крыс без ожога и их эффективности на фоне ОШ по динамике цитологических, гистоморфологических и ультраструктурных изменений респираторного отдела легких. Раствор HAES-LX 5% на клеточном уровне способствует улучшению показателей клеточного цикла легких: уменьшает блок пролиферации (ВР), увеличивает синтез ДНК (S-фаза) и уменьшает количество клеток с фрагментированной ДНК в интервале апоптоза (SUB-G0G1), что свидетельствует об антиапоптотическом эффекте препарата. На субклеточном уровне доказана способность КГР HAES-LX 5% восстановливать эндотелий сосудов, удержавать жидкость в микроциркуляторном русле, улучшать морфофункциональное состояние аэрогематического барьера легких, стимулировать активность альвеолярных макрофагов и секреторную функцию альвеолоцитов II типа, продуцирующих сурфактант, уменьшать объем поврежденных участков легких. По величине цитопротекторного эффекта на клетки легких в условиях ОШ раствор HAES-LX 5% сопоставляется, а в ряде случаев и превосходит референспрепарат ЛПС. В результате исследований установлено, что КГР НАЕS-LX 5% обладает противовоспалительными, антитоксическими, антиоксидантными, мембраностабилизирующими, антифиброгенными, антиапоптотическими, цитопротекторными свойствами, которые составляют основу пульмопротекторного действия препарата и способствуют нормализации нарушенных метаболических процессов в организме и тканях легких крыс в условиях ОШ. Результаты исследования дополнили теоретические сведения о патогенезе ОШ, морфофункциональных изменениях в легких и характере репаративных процессов в органах дыхания при применении раствора HAES-LX 5%. Таким образом, экспериментально обоснована целесообразность применения нового КГР НАЕS-LX 5% в качестве лекарственного средства метаболического действия в комплексной фармакотерапии ОШ. Полученные результаты создают основу для дальнейшего применения исследуемого препарата в клинической практике при лечении последствий ОШ.

The thesis is devoted to study of preclinical therapeutic action of the new colloid-hyperosmolar solution HAES-LX 5% in violation of homeostasis of the body and damage the lungs of rats in conditions of burn shock caused by burn injury. A pharmacodynamic effect of new domestic HAES-LX 5% colloidalhyperosmolar solution were compared with the ones of a reference drug – lactoproteinum with sorbitol on dynamics of survival, body weight, systemic inflammatory response and endogenous intoxication, oxidative, nitrosative and sulfide stress in rats’organism, indicators of pro- and antioxidative systems, phospholipids cell membranes, degradation and fibrogenesis markers, lung cell cycle and DNA fragmentation in rats’ lungs, morphological and ultrastructural changes in respiratory tract The study found that the solution HAES-LX 5% has anti-inflammatory, antitoxic, antioxidant, membranestabilizative, antifibrogenic, antiapoptotic, cytoprotective and pulmoprotective effects. The results of the study have complemented the theoretical information related to the course of disease, the morphological changes in lungs in the period of burn shock and the nature of reparative processes in respiratory organs following the administration of HAES-LX 5% solution. The results obtained provide a basis for further use of the investigational drug in clinical practice for treatment of patients with burn shock.