Фармакогностичне дослідження джерел фенілпропаноїдів та розробка лікарських засобів на їх основі для лікування захворювань сечостатевої системи

Abstract

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора фармацевтичних наук 15.00.02 – фармацевтична хімія та фармакогнозія. – Національний фармацевтичний університет, МОЗ України, Харків, 2020. Робота присвячена експериментальному вирішенню наукової проблеми фармакогностичного вивчення рослинних джерел фенілпропаноїдів, науковому обґрунтуванню вибору об’єктів дослідження, стандартизації сировини та розробці лікарських засобів для лікування захворювань сечостатевої системи. Проведено експериментальне дослідження рослинних джерел фенілпропаноїдів та інших груп БАР, що використовуюся для лікування захворювань сечостатевої системи: флавоноїдів, антоціанів, гідроксикоричних кислот, фенологлікозидів, органічних та жирних кислот. За результатами фітохімічного вивчення обрано перспективну сировину для подальшої стандартизації та одержання лікарських засобів рослинного походження: смородини чорної плоди свіжі, висушені та вичавки, грициків звичайних трава, цибулі ріпчастої лушпиння, журавлини плоди свіжі та висушені. Для обраних видів ЛРС визначено основні макро- та мікроскопічні діагностичні ознаки, а також показники якості, розроблено національну монографію «Грициків траваN» ( ДФУ 2.2) та проєкти національних монографій «Смородини чорної плоди свіжіN» та «Смородини чорної плоди висушеніN», які рекомендовано для внесення до ДФУ 2.4. Одержано лікарські рослинні засоби на основі перспективної сировини, для яких проведено вивчення хімічного складу, стандартизацію і встановлено антимікробну, протизапальну та кровоспинну активність. Розроблено методики контролю якості препарату «Афлазин» (реєстраційне посвідчення № UA/11171/01/01 від 12.11.2015 р.) та дієтичної добавки «Діурол» виробництва ТОВ «ВАЛАРТІН ФАРМА», які містять рослинні джерела фенілпропаноїдів і використовуються для лікування та профілактики захворювань сечовидільної системи.

The work is devoted to the experimental solving of a scientific problem of pharmacognostic research on the herbal sources of phenylpropanoids, scientific grounding of the choice of the objects for the research, herbal raw material standardization and development of medicinal agents for the urogenital system disorders treatment. The analysis of medicinal agents for the treatment of abnormal uterine bleedings and urological disorders in Ukrainian pharmaceutical market by assortment structure was carried out, and market segmentation by the country of origin, origin of active pharmaceutical ingredient and form of presentation was performed. Marketing research has shown limited assortment of medical agents of herbal origin, which became the basis for the search of herbal sources of phenylpropanoids with large raw material base, as well as the creation of domestic medicinal agents with the purpose of widening the assortment of medicines in the market segment of interest. The experimental research on the herbal sources of phenylpropanoids and other groups of biologically active compounds, which are used in the urogenital system disorders treatment: flavonoids, anthocyanidins, hydroxycinnamic acids, phenolic glycosides, organic and fatty acids, was carried out. Using HPLC method the high quercetin concentration (10.22 mg/g) was determined in husks of all the studied onion cultivars. Delphinidin-3-O-arabinoside was found to quantitatively prevail (13.40 mg/g) over 13 anthocyanidins identified in black currant fruits. The quantitative content of identified anthocyanidins in small cranberry fruits was 10.17 mg/g, 5.32 mg/g of which comprised cyanidin-3-O-glucoside. The received data indicate that black currant herbal raw material dominated by the content of anthocyanidins. The anthocyanidins distribution was determined in a row fruit pomace > fresh fruits > dried fruits, which signified the prevalent anthocyanidins accumulation in fruit skins. The highest content of anthocyanidins among the studied raw material was determined in black currant raw material of Muza cultivar, onion husks of Mars cultivar, and in large cranberry raw material. The research carried out helped identifying 5 phenolic acids in shepherd’s purse herb, 4 acids in black currant and small cranberry fruits each, and 2 phenolic acids in onion husks. Chlorogenic acid was identified in all the objects studied with its maximum concentration in black currant fruits. The arbutin content in cranberry fruits comprised 0.60 mg/g. The content of antioxidants was the highest in black currant fruits (7.45 mg/g), and the content of phylloquinone – in shepherd’s purse herb (17.41 mg/g), which was determined by HPLC. The GC-MS method allowed identifying and quantifying organic acids and volatile compounds. The studied plant material accumulated significant amount of citric and malic 40 acids; unsaturated fatty acids, in particular, linoleic and linolenic acids, dominated among aliphatic monocarboxylic (fatty) acids. Experimental data of the phytochemical study of the objects of the research allowed choosing prospective raw material for the further standardization and herbal medicinal agents’ development: black currant fruits in the fresh, dried and pomace state, shepherd’s purse herb, onion husks, fresh and dried cranberry fruits. For the chosen herbal raw material types the main macro- and microscopic diagnostic features, as well as the quality parameters, were determined, which underlay the development of the national monograph “Shepherd’s Purse HerbN”, included in the SPU 2.2, and the projects of national monographs “Black currant Fruits FreshN” and “Black currant Fruits DriedN”, recommended for the inclusion into the SPU 2.4. Herbal medicinal agents on the basis of prospective raw material, containing phenylpropanoids, were developed: fresh cranberry fruits dry extract, shepherd’s purse herb thick extract, onion husks dry extract, “Oxyriburcep” species in the form of briquettes, “Riglycep” briquettes, for which the chemical composition was studied and standardization parameters were determined. The antimicrobial activity towards Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, Bacillus subtilis, Candida albicans and anti-inflammatory activity on the model of carrageenan-induced edema of the obtained herbal medicinal agents was determined by pharmacological studies. Antihemorrhagic activity was proven for the shepherd’s purse herb thick extract. The projects of quality control methods for “Cranberry fruits fresh”, “Cranberry fruits dried”, “Onion husks”, “Black currant pomace”, “Cranberry fruits dry extract”, “Onion husks dry extract”, “Shepherd’s purse herb dry extract”, “Oxyriburcep” species in the form of briquettes”, and “Riglycep” briquettes” have been developed, which are reproduced under industrial conditions of “Fittex” LLC. The quality control methods for the medication “Aflazin” (registration certificate № UA/11171/01/01 of 12.11.2015) and a dietary supplement “Diurol” produced by Valartin Pharma LLC, which contain the herbal sources of phenylpropanoids and are used in the urogenital system disorders treatment and prophylaxis, were developed.

Работа посвящена экспериментальному решению научной проблемы фармакогностического изучения растительных источников фенилпропаноидов, 41 научного обоснования выбора объектов исследования, стандартизации сырья и разработке лекарственных средств для лечения заболеваний мочеполовой системы. Проведено экспериментальное исследование растительных источников фенипропаноидов и других групп БАВ, которые используются для лечения заболеваний мочеполовой системы: флавоноидов, антоцианов, гидроксикоричных кислот, фенологликозидов, органических и жирных кислот. В результате фитохимического изучения выбрано перспективное сырье для дальнейшей стандартизации и получения лекарственных средств растительного происхождения: смородины черной плоды свежие, высушенные и выжимки, пастушьей сумки трава, лука репчатого шелуха, клюквы плоды свежие и высушенные. Для выбранных видов ЛРС определены основные макро- и микроскопические диагностические признаки, а также показатели качества, разработана национальная монография «Пастушьей сумки траваN» (ГФУ 2.2) и проекты национальных монографий «Смородины черной плоды свежиеN» и «Смородины черной плоды высушенныеN», которые рекомендовано для включения в ГФУ 2.4. Получены лекарственные растительные средства на основе перспективного сырья, для которых проведено изучение химического состава, стандартизация и определена антимикробная, противовоспалительная и кровоостанавливающая активность. Разработаны методики контроля качества препарата «Афлазин» (регистрационное свидетельство №UA/11171/01/01 от 12.11.2015 г.) и диетической добавки «Диурол» производства ООО «ВАЛАРТИН ФАРМА», которые содержат растительные источники фенилпропаноидов и используются для лечения и профилактики заболеваний мочевыделительной системы.