Розробка методів аналітичної діагностики отруєнь декстропропоксифеном

Abstract

Дисертаційна робота присвячена хіміко–токсикологічному дослідженню наркотичного анальгетика – декстропропоксифену. Вперше проведені порівняльні дослідження методів ізолювання декстропропоксифену з біологічних об’єктів, різних депротеїнізаторів на вихід декстропропоксифену із трупної крові та оптимізовані умови проведення пробопідготовки. Розроблена методика проведення токсикологічного скринінгу на декстропропоксифен методом ТШХ, що дозволяють виявляти його та його метаболіт – нордекстропропоксифен у біологічному матеріалі. Розроблено методики виявлення та визначення декстропропоксифену в біологічному матеріалі методами газорідинної та високоефективної рідинної хроматографії, визначені їх метрологічні характеристики та границі використання. На основі проведених досліджень розроблено алгоритм проведення хіміко-токсикологічного дослідження на декстропропоксифен.

Диссертационная работа посвящена химико–токсикологическому исследованию наркотического анальгетика – декстропропоксифена и разработке методов аналитической диагностики приема и отравлений этим препаратом, пригодных для целей наркологической экспертизы, клинической и судебно–медицинской токсикологии. Изучена селективность зарегистрированных в Украине тест-систем «Экстази», «Барбитураты», «Фенциклидин» «Опиаты», «Амфетамин», «Метамфетамин», «Кокаин», «ТСН», «Метадон», «Бупренорфин» в отношении декстропропоксифена. Установлено отсутствие перекрестной чувствительности перечисленных тест-систем к последнему. В то же время показано, что иммунохроматографические системы "Пропоксифен", предназначенные для обнаружения декстропропоксифена, имеют перекрестную реактивность к трамадолу и его метаболитам и могут давать ложно-положительные результаты даже при отсутствии декстропропоксифена в биоматериале. Исследованы возможности различных видов тонкослойной хроматографии для обнаружения декстропропоксифена в биологическом материале. Установлено, что обнаружить декстропропоксифен и его метаболит – нордекстропропоксифен в присутствии ряда других контролируемых средств в условиях стандартных скрининговых подвижных фаз не удается. Предложены селективные хроматографические системы для идентификации целевых веществ, а также специфические проявители, которые позволяют надежно обнаруживать нордекстропропоксифен и декстропропоксифен в присутствии веществ, употребляемых совместно. Разработана методика обнаружения и определения декстропропоксифена в биологическом материале методом реакционной газожидкостной хроматографии по продукту гидролиза. Структура продукта гидролиза была подтверждена методом хроматомасс-спектрометрии. Диапазон линейных концентраций методики находится в пределах от 1,0 до 50,0 мг/л. Относительная неопределенность среднего результата не превышает ±12,5%. Проведено сравнительное изучение изолирования декстропропоксифена из биологического материала методами Стаса-Отто и Васильевой. Выходы декстропропоксифена составили 19 и 28%, соответственно. Разработана методика обнаружения и определения декстропропоксифена методом микроколоночной высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием. Линейность методики перекрывает диапазоны – от терапевтических до летальных концентраций. Относительная погрешность не превышает допустимые при исследовании биологических объектов значения. Изучено влияние депротеинизаторов на изолирование декстропропоксифена из крови, а также экстракция органическими растворителями из сухой смеси крови с безводным натрия сульфатом. Установлено, что оптимальное соотношение выход-чистота экстрактов обеспечивается при использовании в качестве осадителя белка и экстрагента ацетонитрила. Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии изучена сохраняемость дектропропоксифена в гнилостно-измененном биологическом материале в условиях, имитирующих природное захоронение. Предельный срок возможного обнаружения декстропропоксифена в гнилостно-измененном биологическом материале ограничен тремя месяцами. По результатам проведенных исследований предложен алгоритм проведения аналитической диагностики отравлений декстропропоксифеном, основанный на разработанных методиках пробоподготовки биологического материала, обнаружении его скрининговыми исследованиями методом тонкослойной хроматографии и подтверждающих исследований методами газожидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии, пригодный для использования в наркологической и судебно-токсикологической экспертизе, клинической токсикологии.

The thesis is devoted to chemical-toxicological investigation narcotic analgesics - propoxyphen. A comparative study of methods of propoxyphen isolation from biological objects, various deprotonating agents on the propoxyphen output of cadaveric blood and optimized conditions of sample preparation was carried out. Developed method for toxicologycal screening of propoxyphen and its metabolite-norpropoxyphene in biological material by TLC method. The methods of detection and identification of propoxyphen in biological material by of gas-liquid and high performance liquid chromatography were developed and identified their metrological characteristics and limits of use. The research algorithm of chemical-toxicological studies on propoxyphen, based on the carried out investigations is developed.