The study of the therapeutic action of the cell-associated antigens of Candida Albicans and Candida Tropicalis fungi

Abstract

Fungi of Candida genus are the most widespread causative agent of fungal infections. Candida causes a wide range of infections: from insignificant diseases of the skin and mucous membranes to invasion processes that can practically destroys all organs. Development of a vaccine against candidiasis is the topical issue of modern pharmacy and medicine. Suspensions of cells of Candida albicans and Candida tropicalis fungi were subjected to the action of ultrasound, then filtered through a “Vladipore” membrane MFА-МА No.3 providing separation of the biological material with the size of 10 kDa and its concentration. Then prefiltration and sterilizing filtration were carried out. The resulting purified antigens of Candida albicans fungi cells with the protein concentration of 3 mg/ml and Candida tropicalis with the protein concentration of 5 mg/ml were mixed in the ratio of 1:1 using a mixer with the rotation speed of 100 rpm for 10 min. In the experiment two-month white mice with the body weight of 18-22 g were used; there were 6 animals in the control and test groups. The animals were infected intraperitoneally with the suspension of Candida albicans in the amount of 20 mln of cells and Candida tropicalis in the amount of 60 mln of cells in the volume of 1 ml. In 5 days the cell-associated antigens of Candida fungi in the volume of 0.2 ml were injected intramuscularly to mice in the upper part of the rear right paw. In 14 days the procedure was repeated. The animals of the control group were injected with the sterile 0.9% isotonic saline solution. After that in 14 days the animals were examined and the results were determined. According to the research results it has been found that the cell-associated antigens of Candida albicans and Candida tropicalis provide the therapeutic effect in 100% of animals when injected intramuscularly in the volume of 0.2 ml.

Candida викликає широкий діапазон інфекцій: від незначних захворювань шкіри та слизових оболонок до інвазійних процесів, які можуть вражати практично усі органи. Розробка вакци- ни проти кандидамікозу є актуальним питанням сучасної фармації та медицини. Суспензії клітин грибів Candida albicans та Candida tropicalis піддавали дії ультразвуку, фільтрували через мембрану «Владипор» МФА-МА №3 з розміром 10 кДа, проводили попередню та стере- лізуючу фільтрацію. Одержані стерильні очищені антигени клітин грибів Candida albicans з концентрацією білка 3 мг/мл та Candida tropicalis з концентрацією білка 5 мг/мл змішували у співвідношенні 1:1 за допомогою мішалки. У досліді використовували двомісячних білих мишей масою 18-22 г по 6 тварин у контрольних та дослідних групах. Тварин заражали внутріш- ньоочеревинно суспензією грибів Candida albicans 20 млн клітин та Candida tropicalis 60 млн клітин в об’ємі 1 мл. Через 5 діб мишам внутрішньом’язово вводили асоційовані антигени клітин грибів Candida у об’ємі по 0,2 мл. Через 14 діб повторювали цю процедуру. Тваринам у контрольній групі вводили стерильний ізотонічний розчин 0,9% натрію хлориду, після чого через 14 діб проводили огляд тварин та визначали результати. За результатами досліджень встановлено, що одержані асоційовані антигени клітин грибів Candida забезпечують тера- певтичний ефект у 100% тварин при внутрішньом’язовому введенні в об’ємі 0,2 мл.

Candida вызывает широкий диапазон инфекций: от незначительных заболеваний кожи и сли- зистых оболочек до инвазионных процессов, которые могут поражать практически все ор- ганы. Разработка вакцины против кандидамикоза является актуальным вопросом совре- менной фармации и медицины. Суспензии клеток грибов Candida albicans и Candida tropicalis подвергали действию ультразвука, фильтровали через мембрану «Владипор» МФА-МА №3 с размером пор 10 кДа, проводили предварительную и стерилизующую фильтрацию. Полу- ченные стерильные очищенные антигены клеток грибов Candida albicans с концентрацией белка 3 мг/мл и Candida tropicalis с концентрацией белка 5 мг/мл смешивали в соотношении 1:1 с помощью мешалки. В эксперименте использовали двухмесячных белых мышей массой 18-22 г по 6 животных в контрольной и исследуемой группах. Животных заражали внутри- брюшинно суспензией грибов Candida albicans 20 млн клеток и Candida tropicalis 60 млн кле- ток в объеме 1 мл. Через 5 суток мышам внутримышечно вводили ассоциированные анти- гены клеток грибов Candida в объеме 0,2 мл. Через 14 суток повторяли эту процедуру. Животным в контрольной группе вводили стерильный изотонический раствор 0,9% натрия хлорида. После чего через 14 суток проводили осмотр животных и определяли результаты. Согласно результатам исследования установлено, что полученные ассоциированные ан- тигены клеток грибов Candida обеспечивают терапевтический эффект у 100% животных при внутримышечном введении в объеме 0,2 мл.