Фармакологічна активність нових похідних 4-R-5-(алкіл-, арил-, гетерил-)-1,2,4-тріазолу при експериментальному токсичному гепатиті

Abstract

Дисертація присвячена вивченню гепатопротекторних властивостей нових похідних 4-R-5-(алкіл-, арил-, гетерил-)-1,2,4-тріазолу в умовах експерименту з трьома типами моделювання гострого гепатиту. Встановлено, що досліджувані похідні 1,2,4-тріазолу мають гепатопротекторну активність. У дослідах in vivo була виявлена сполука 2.8 – 4-аміно-5-(фуран-2-іл)-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіол, що за виразністю гепатопротекторної та антиоксидантної дії перевищувала препарат порівняння – тіотриазолін. У результаті аналізу «структура – фармакологічна дія» було встановлено, що наявність та сила гепатопротекторної та антиоксидантної дії залежить від характеру замісника по 1,2,4-тріазоловому ядру молекули. Визначена гостра токсичність 4-аміно-5-(фуран-2-іл)-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіолу (ЛД50 1311,48 мг/кг при внутрішньоочеревинному введенні). Встановлено, що досліджені речовини мають гепатопротекторну та антиоксидантну активності: за активністю у лікувально-профілактичному режимі вони не поступаються тіотриазоліну. Одержані результати дослідів дають підстави для розгляду 4-аміно-5-(фуран-2-іл)-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіолуяк сполуки для поглибленого доклінічного дослідження з метою створення на його основі потенційного гепатопротекторного засобу.

За последние годы в Украине заболеваемость гепатитами выросла в 2,2 раза, как следствие это привело к увеличению смертности от данной патологии. Не смотря на распространенность лекарственных средств с гепатопротекторными свойствами, они не лишены побочных эффектов. Исходя из вышесказанного актуальным остается поиск новых безопасных и высокоэффективных средств с гепатопротекторной активностью.Диссертация посвящена скрининговому исследованию новых производных 1,2,4-триазола с целью поиска потенциального гепатопротекторного средства. Результаты исследований обработаны современными статистическими методами анализа на персональном компьютере с использованием стандартного пакета программ Microsoft Office 2007 и «Statistica for Windows 6.0» (StatSoft Inc., № AXXR712D833214FAN5). Рассчитаны средние арифметические (М) и стандартные отклонения средней (±m). Достоверность межгрупповых отличий рассчитывали при помощи параметрического t-критерия Стьюдента. Осуществлен прогноз биологической активности производных 1,2,4-триазола с помощью компьютерной программы PASS, который показал целесообразность поиска среди исследуемых соединений с гепатопротекторной активностью. В результате проведенных исследований было установлено, что все отобранные соединения по величине LD50 (668 и 2430 мг/кг) являются малотоксическими по классификации Сидорова К.К. По результатам проведенных экспериментальных исследований in vivo установлено, что производные 1,2,4-триазола на модели острого тетрахлорметанового гепатита проявляют гепатопротекторную активность. Анализ зависимости «химическая структура – фармакологическая активность» среди 37 исследуемых веществ показал, что наличие и выраженность гепатопротекторной и гиполипидемической активности зависят от функциональных заместителей по N4 и C5 положениям ядра 1,2,4-триазола. Проведено доклиническое изучение наиболее перспективного соединения – 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиола в качестве гепатопротекторного и антиоксидантного средства. Определена среднеэффективная доза (23,21 мг/кг), изучена острая токсичность (LD50 1311,48 мг/кг при внутрибрюшинном введении) и эффективность на моделях острого тетрахлорметанового, парацетамолового и подострого алкогольного гепатитов. Исследования показали, что применение 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиола приводило к снижению активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, γ-глутамилтранспептидазы, уровня общего и прямого билирубина. Под влиянием 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиола снижался уровень продуктов перекисного окисления липидов, индуцированного экспериментальным гепатитом. Уменьшалось содержание основных продуктов свободнорадикального окисления – диеновых и триеновых коньюгатов, ТБК - активных продуктов. Восстанавливался уровень эндогенного α-токоферола. По эффективности влияния на показатели гепатопротекторного действия 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиол не уступал препарату сравнения тиотриазолину. Таким образом, применение 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиола при экспериментальном токсическом гепатите приводило к восстановлению целостности мембран гепатоцитов и при этом положительно влияло на антиоксидантную систему. По видимому, гепатопротекторный эффект этого вещества связан, прежде всего, с антиоксидантной активностью. Применение соединения 2.8 в условиях алкогольного гепатита приводило к более эффективному по сравнению с тиотриазолином восстановлению гепатоцитов, что сопровождалось более выраженным снижением активности антицитолітичних ферментов АсАТ, АлАТ (р<0,05), лучшим снижением уровня ТБК-АП (р<0,05) и снижением уровня ДК (р<0,05) и ТК (р<0,05). Морфологически наблюдалось восстановление гепатоцитов, формы печеночных балок, гликогенсинтетической функции, уменьшению явлений жировой дистрофии и телец Маллори, усиление адаптативно-компенсаторных механизмов. Полученные результаты позволяют использовать данные зависимости «химическая структура – фармакологическая активность» для дальнейшего целенаправленного синтеза биологически активных веществ с гепатопротекторным и гиполипидемическим действием, рекомендовать 4-амино-5-(фуран-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-тиол для дальнейшего доклинического и клинического исследований и внедрения в медицинскую практику для расширения ассортимента отечественных лекарственных препаратов с гепатопротекторной активностью и высоким профилем безопасности.

The thesis is devoted to the study of hepatoprotective properties of derivatives of 4-R-5-(alkyl-, aryl-, heteryl-)-1,2,4-triazole under experimental toxic hepatitis. It was established that the investigated derivatives of 1,2,4-triazole have hepatoprotective activity. In vivo experiments showed that the strength hepatoprotective activity greater than pharmacological standards – thiotriazolin. The analysis of "structure-action" has been established that the presence and strength of the hepatoprotective activity depends on the nature of the deputy for a 1,2,4-triazole core of the molecule. Determined the acute toxicity of 4-amino-5-(furan-2-yl)-4H-1,2,4-triazole-3-thiol (LD50 1311,48 mg / kg intragastric injection). It is established that the investigated compounds have hepatoprotective activity: the activity at a health care regime do not differ from the effect of thiotriazolin. Experimental data give grounds to consider 4-amino-5-(furan-2-yl)-4H-1,2,4-triazole-3-thiol for advanced preclinical studies to create on its basis a potential hepatoprotective agent.