Експериментальне обґрунтування створення м’яких лікарських форм із керамідами для лікування запальних захворювань шкіри та ранового процесу

Abstract

Роботу присвячено експериментальному вивченню специфічної фармаколо- гічної дії керамідів та фармакологічному обґрунтуванню доцільності створення МЛЗ, що містять сильні ГКС чи декспантенол сумісно з керамідами, для зменшення місцевих побічних ефектів та підвищення якості або ефективності лікування запальних захворювань шкіри та ранового процесу. Вперше на моделях РП встановлено, що кераміди мають ранозагоювальну дію. З’ясовано, що механізм ранозагоювальної дії керамідів полягає в пригніченні запально-деструктивних процесів та активації проліферації у рані. Доведено, що крем мометазону 0,1 % із керамідами і мазь метилпреднізолону 0,1 % із керамідами виявляють протизапальну, антиексудативну, антиальтеративну, цитопротекторну, протиалергічну, антиоксидантну, антицитокінову, помірну проліферативну дію і не чинять атрофічної дії. Встановлено, що за вираженістю лікувальної дії МЛЗ, що містять ГКС із керамідами, не поступаються препаратам порівняння Елоком® крем 0,1 % і Адвантан® мазь 0,1 %. Доведено, що крем декспантенолу 5 % із керамідами виявляє раноза- гоювальну, проліферативну, протизапальну, цитопротекторну, антиоксидантну, капіляроутворювальну дію. За вираженістю цих ефектів крем декспантенолу 5 % із керамідами перевищує дію препарату порівняння Бепантен® крем 5 %. Встановлено, що механізм ранозагоювальної дії крему декспантенолу із керамідами полягає у пригніченні рівня прозапальних цитокінів (IL-1 і TNF), збільшенні рівня РНК у цитоплазмі фібробластів та експресії Кі-67 епітеліоцитами, що сприяє швидкому загоєнню ран без утворення грубих рубців.

Работа посвящена экспериментальному изучению специфического фармако- логического действия керамидов и фармакологическому обоснованию целесообразности создания мягких лекарственных средств (МЛС), содержащих сильные ГКС или декспантенол совместно с керамидами для уменьшения местных побочных эффектов и повышения качества или эффективности лечения воспалительных заболеваний кожи и раневого процесса. Впервые на моделях плоскостных и линейных резаных ран установлено, что керамиды обладают ранозаживляющим действием (сокращают сроки заживления ран на 6 дней и повышают прочность рубца на 76,2 % по сравнению с группой КП). Установлено, что механизм ранозаживляющего действия керамидов заключается в угнетении воспалительно-деструктивных процессов и активации пролиферации эпителиальных клеток в ране. В результате скрининговых исследований установлено, что МЛС, которые содержат сильные ГКС с керамидами, обладают противовоспалительными свойствами. Доказано, что введение керамидов не оказывает значительного влияния на противовоспалительные свойства ГКС (на моделях декстранового и аэросильного отеков разница между суммарными эффектами кремов ГКС с керамидами и без керамидов была в пределах 7,3-14,7 % и 2,8-6,6 % соответственно). Отмечено, что керамиды в составе кремов с ГКС способствуют снижению негативного влияния последних на заживление ран: крем мометазона 0,1 %, содержащий 0,5 % керамидов, способствует эпителизации ран у 50 % животных и повышает прочность рубца на 19 % по сравнению с кремом мометазона 0,1 % без керамидов. На модели линейных резаных ран тензиометрические исследования показали, что керамиды рационально вводить в концентрации 0,2 % в состав крема декспантенола 5 %, репаративная активность которого повышается при этом до 91,1 %. Установлено, что в условиях экссудативного, альтеративного и аллергичес- кого воспаления крем мометазона 0,1 % с керамидами и мазь метилпреднизолона 0,1 % с керамидами обладают антиэкссудативным действием (на модели зимозанового отека в конце опыта эффект препаратов было на уровне 40 % и 39,4 %, а на модели декстранового отека – 36,4 % и 31,3 % соответственно), антиальтеративным и цитопротекторным действием (74,4 % и 76,7 %), противовоспалительным (69,3 % и 75,0 %), противоалергическим (43,3 % и 47,7 %) и антиоксидантным действием (20,7 % и 22,9 %) и по выраженности лечебного действия не уступают препаратам сравнения. Установлено, что в условиях аллергического и неаллергического контактного дерматита керамиды в составе МЛС с ГКС положительно влияют на восстановление кожи: состояние эпидермиса при нанесении крема мометазона 0,1 % с керамидами лучше в 1,4 и 1,9 раза по сравнению с препаратом Элоком® крем 0,1 %, а мази метилпреднизолона 0,1 % с керамидами – в 1,7 и 3,5 раза по сравнению с препаратом Адвантан® мазь 0,1 %; воспаление в дерме снижается больше в 4,5 и 2,8 раза и в 4,1 и 4,0 раза соответственно). Результаты иммуногистохимических исследований подтвердили, что керамиды уменьшают антипролиферативные свойства ГКС, о чем свидетельствует увеличение интенсивности свечения маркера пролиферации Кі-67 при нанесении крема мометазона 0,1 % с керамидами в 2,1 раза по сравнению с препаратом Элоком® крем 0,1 %, а также образование зрелой ткани на месте повреждения под влиянием мази метилпреднизолона 0,1 % с керамидами. Установлено, что керамиды в составе МЛС с ГКС снижают риск развития атрофических процессов в коже за счёт повышения процессов пролиферации в эпидермисе. Результаты токсикологических исследований показали, что препараты с ГКС и керамидами не оказывают сенсибилизирующего, иммунодепрессивного и местнораздражающего действия. На моделях линейных, плоскостных, химических и ожоговых ран установ- лено, что крем декспантенола 5 % с керамидами обладает ранозаживляющим, пролиферативным, противовоспалительным, цитопротекторным, антиоксидантным и капиллярообразующим действием. По уровню ранозаживляющей активности крем декспантенола 5 % с керамидами превышает препарат Бепантен® крем 5 %, о чем свидетельствует сокращение сроков заживления плоскостных, химических, ожоговых ран на 2 дня. Показано, что декспантенола 5 % с керамидами достоверно превышает препарат сравнения по противовоспалительному действию (снижение уровня IL-1α в среднем в 4,3 раза, TNFα в 1,6 раза, СРБ в 2,1 раза), антиокси- дантному действию (снижение уровня ОМБ в 1,3 раза), капиллярообразующему действию (увеличение плотности сосудов в 1,4 раза) и пролиферативному действию (увеличение уровня Кі-67 в 1,4 раза). Гистологическими исследованиями доказано, что введение керамидов в крем декспантенола 5 % достоверно повышает степень дозревания грануляционной ткани и эпителизации в ожоговой ране (в 1,4 раза) по сравнению с препаратом сравнения, что способствует скорейшему и качественному заживлению ран. Установлено, что крем декспантенола 5 % с керамидами имеет полимодальный механизм ранозаживляющего действия, который заключается в угнетении воспалительно-деструктивных процессов, повышении уровня РНК в цитоплазме фибробластов и пролиферации эпителиальных клеток. Полученные результаты фармакологически обосновывают и подтверждают рациональность разработки препарата, который содержит декспантенол совместно с керамидами с целью усовершенствования эффективности местного лечения ран. На основании результатов экспериментальных исследований доказано ранозаживляющее действие керамидов и целесообразность создания МЛС, содержащих сильные ГКС или декспантенол совместно с керамидами, что позволяет уменьшить местные побочные эффекты и повысить качество или эффективность лечения воспалительных заболеваний кожи и раневого процесса.

The work is dedicated to the experimental study of ceramides specific pharmacological action as well as to the pharmacological substantiation of the expediency of the development of soft medicinal forms containing highly active corticosteroids or dexpanthenol combined with ceramides, in order to reduce the local side effects and to increase the quality or effectiveness of the treatment of inflammatory skin diseases and wound healing process. For the first time on the models of wound healing process it has been found that ceramides exert a wound healing effect. It has been established that the mechanism of ceramides wound healing effect consists in inhibition of the inflammatory and destructive processes and in activation of proliferation within the wound. It has been proven that the cream containing mometasone (0.1 %) with ceramides and the ointment containing methylprednisolone (0.1 %) with ceramides possess antiinflammatory, antiexudative, antiulcerative, cytoprotective, antiallergic, antioxidant, anticytokine, moderate proliferative activity and do not cause dermal atrophy. It has been found that the soft medicinal forms containing corticosteroids with ceramides are not inferior to the reference drugs Elokom® cream 0,1 % and Advantan® ointment 0.1 % by the therapeutic effect. It has been established that the cream containing dexpanthenol (5 %) with ceramides exerts wound healing, proliferative, anti-inflammatory, cytoprotective, antioxidant, promoting capillary formation activity. By these effects degree the cream containing dexpanthenol (5 %) with ceramides surpasses the reference drug Bepanten® cream 0.1 %. It has been found that the mechanism of wound healing effect of this cream can be attributed to the reduction of the level of proinflammatory cytokines (IL-1 and TNF), to the increase in the level of RNA in the cytoplasm of fibroblasts as well as Kі-67 expression by epitheliocytes, contributing to the rapid healing of the wound without scar formation.