Хіміко-токсикологічне дослідження хлоропіраміну гідрохлориду

Abstract

Дисертацію присвячено хіміко-токсикологічному аналізу хлоропіраміну гі- дрохлориду. Розроблено методики ідентифікації хлоропіраміну при скринінгових дослідженнях і комбінованих отруєннях у присутності антигістамінних пре- паратів (дифенгідраміну гідрохлориду (димедролу), клемастину гідрофумарату (тавегілу), квіфенадіну (фенкаролу), ципрогептадину гідрохлориду (перитолу), мебгідроліну (діазоліну), лоратадину та цетиризину гідрохлориду) за допомогою методів ТШХ, ВЕРХ, ГРХ. Розроблено методики кількісного визначення хлоропіраміну гідрохлориду за допомогою спектрофотометрії в УФ-області спектра, екстракційної фотометрії, ВЕРХ, ГРХ, придатні для цілей хіміко-токсикологічного аналізу. Порівняно ефективність загальних методів ізолювання органічних сполук щодо хлоропіраміну. Розроблено індивідуальний метод ізолювання хлоропіраміну хлороформом із біологічного матеріалу. Запропоновано методику очищення хло- ропіраміну від співекстрактивних речовин у витягах із біологічного матеріалу із застосуванням екстракції гексаном і ТШХ-методом. Вивчено розподіл хлоропіраміну в органах отруєних тварин. Встановлено, що при летальних отруєннях хлоропіраміну необхідно досліджувати шлунок і кишківник із вмістом,селезінку, печінку, легені, мозок, нирки. При застосуванні ГРХ/МС  методики проведено ідентифікування хлоропіраміну у витягах з орга- нів отруєних тварин. Встановлено термін зберігання хлоропіраміну в біологічному матеріалі при його гнитті. Обґрунтовано схему спрямованого хіміко-токсикологічного аналізу біоматеріалу на хлоропірамін. Наукова новизна результатів роботи підтверджена патентом та інформаційними листами.

Диссертационная работа посвящена химико-токсикологическому исследо- ванию хлоропирамина гидрохлорида. Идентификацию хлоропирамина проводили физико-химическими (ТСХ, ВЭЖХ, ГЖХ) методами. Изучено хроматографическое поведение хлоропирамина в присутствии ан- тигистаминных препаратов: дифенгидрамина гидрохлорида (димедрола), клемас- тина гидрофумарата (тавегила), квифенадина (фенкарола), ципрогептадина гидро- хлорида (перитола), мебгидролина (диазолина), лоратадина и цетиризина гидрох- лорида ТСХ-методом с использованием трех типов хроматографических пластин и 17 систем растворителей. Установлено, что наиболее чувствительными прояви- телями при ТСХ-анализе хлоропирамина являются УФ-свет (λ = 254 нм) и реак- тив Драгендорфа, модифицированный по Мунье. При ВЭЖХ-анализе хлоропирамина гидрохлорида и антигистаминных пре- паратов установлены основные параметры идентификации: время и объем удер- живания, спектральные отношения, а также параметры разделения пиков. Устано- влено, что минимальная концентрация хлоропирамина гидрохлорида в растворе, которую можно определить при помощи разработанной методики, равна 10,0 мкг/мл, что соответствует содержанию 40,0 нг вещества в пробе. В результате ГЖХ-анализа установлено, что разработанная хроматографическая методика ха- рактеризуется селективностью и высокой чувствительностью, так как минималь- ная концентрация хлоропирамина гидрохлорида в растворе, которую можно определить, равна 0,1 мкг/мл, что соответствует содержанию вещества 0,1 нг в пробе. Идентификацию хлоропирамина гидрохлорида методом спектрофотометри в УФ-области спектра проводили в условиях, обеспечивающих наибольшую чувс- твительность анализа − растворитель − 0,1 М раствор кислоты хлоридной, λmax 312 ± 2 нм. Предел обнаружения препарата − 5,0 мкг/мл. Разработаны методики количественного определения хлоропирамина гид- рохлорида, пригодные для ХТА (ВЭЖХ, ГЖХ-методики, экстракционная фото- метрия). Методика экстракционно-фотометрического определения хлоропирами- на гидрохлорида с использованием бромтимолового синего позволяет определить препарат в пределах концентраций 15,0 − 125,0 мкг/мл, относительная неопреде- ленность среднего результата − ± 2,16%. При проведении исследований установ- лено, что методом абсорбционной спектрофотометрии в ультрафиолетовой облас- ти спектра можно определить хлоропирамина гидрохлорид в пределах концен- траций 5,0 − 35,0 мкг/мл, относительная неопределенность среднего результата − ± 1,95%. При использовании разработанных ВЭЖХ- и ГЖХ-методик количест- венного определения хлоропирамина гидрохлорида можно определить препарат в пределах концентраций 10,0 − 200,0 мкг/мл, относительная неопределенность среднего результата − ± 1,91% (ВЭЖХ-метод); в пределах концентраций 0,25 − 2,0 мкг/мл, относительная неопределенность среднего результата − ± 2,11% (ГЖХ-метод). Изучено влияние факторов (природы экстрагента, рН среды, присутствия и концентрации высаливателя) на степень экстракции хлоропирамина из водных растворов органическими растворителями при использовании метода математиче- ского планирования эксперимента. Установлено, что оптимальными значениями для экстракции хлоропирамина из водной фазы (76,6%) является применение хлороформа как экстрагента при рН 9,0 − 10,0. Проведена сравнительная оценка результатов общепринятых методов изо- лирования органических соединений основного характера относительно хлоро- пирамина. Разработана эффективная методика выделения хлоропирамина с по- мощью хлороформа с последующим очищением экстракционным и ТСХ- методами, что позволяет определить до 73,4 ± 3,51% хлоропирамина. Разработа- ны методики изолирования хлоропирамина из крови и мочи, которые позволяют определить 38,6 ± 4,22% и 56,4 ± 3,15% вещества соответственно. Изучено распределение хлоропирамина в органах отравленных животных. Установлено, что при летальных отравлениях хлоропирамином необходимо ис- следовать кишечник с содержимым, печень, легкие, мозг, почки, селезенку, кровь. Идентификация хлоропирамина в полученных экстрактах из органов от- равленных животных проведена ГЖХ/МС - методом. Установлены сроки сохранения хлоропирамина в биологическом материале при его гнилостном разложении − через 21 день сохранения хлоропирамина в пе- чени трупа при ее загнивании можно определить 13,8% вещества; через 28 дней сохранения хлоропирамин определить невозможно. В результате систематических исследований обоснована схема направлен- ного химико-токсикологического анализа биоматериала на хлоропирамин, которая включает методики его изолирования из биологического материала, очищения полученных экстрактов, идентификации и количественного определения.

The thesis is devoted to the chemical-toxicological analysis Chloropyramine hydrochloride. Identification Chloropyramine was performed by physicochemical (TLC, HPLC, GLC) methods. The methods of identification Сhloropyramine in screening studies and combined poisoning in the presence of antihistamines: diphenhydramine hydrochloride (dimedrolum), clemastine fumarate (tavegil), kvifenadine (phencarolum), cyproheptadine hydrochloride (peritol), mebhydrolin (diazolinum), loratadine and cetirizine hydrochloride were developed by TLC, HPLC, GLC methods. Methods of quantitative determination chloropyramine using UV spectrophotometry, extractive photometry, HPLC, GLC suitable for the purposes of chemical-toxicological analysis were developed. A comparison of the efficiency of the common methods of isolation Chloropyramine was conducted. The method of isolating of individual Сhloropyramine by chloroform from biological material was developed. The method of Сhloropyramine cleaning from admixtures in extracts from biological material using hexane extraction and TLC method was proposed. The distribution of Chloropyramine in bodies of poisonous animals was studied. It was established that the fatal poisoning Chloropyramine is necessary to examine the stomach and intestines containing, spleen, liver, lungs, brain, kidneys. When using the GLC / MS technique identification Chloropyramine in extracts from organs of animals poisoned was conducted. Set retention period Chloropyramine in biological material when it is rotting. The scheme of directed chemical-toxicological analysis of biological material on Chloropyramine was substantiated. Scientific novelty of the work is confirmed by patent and newsletters.