Фармакогностичне вивчення надземної частини вітексу священного (Vítex agnus-castus L.) та вітексу коноплевидного (V. cannabifolia Sieb.)

Abstract

Дисертаційну роботу присвячено комплексному фармакогностичному вивченню сировини вітексу священного (Vítex agnus-castus L.) та вітексу коноплевидного (V. cannabifolia Sieb.), розробці фітозасобів на їхній основі, а також стандартизації лікарської рослинної сировини та запропонованої настойки. В сировині, що вивчалася, досліджено якісний склад та визначено кількісний вміст основних груп біологічно активних речовин. З листя вітексу священного було виділено в індивідуальному стані та встановлено структуру 7 сполук: 1 ароматична кислота, 3 флавоноїди, 2 іридоїди та 1 дитерпен. Методами ГХ-МС, ВЕРХ, атомно-абсорбційної спектроскопії та УФ- спектрофотометрії встановлено наявність та визначено кількісний вміст флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, дубильних речовин, іридоїдів, амінокислот, різних груп вуглеводів, карбонових кислот, терпеноїдів, а також 19 макро- та мікроелементів, та 17 жирних кислот. Проведено стандартизацію листя вітексу священного та листя вітексу коноплевидного, запропоновано технологію виробництва настойки листя вітексу священного. Для запропонованих засобів виявлено антирадикальну, седативну та гепатопротекторну активності, встановлена їх нетоксичність.

Диссертация посвящена комплексному фармакогностическому исследованию витекса священного (Vítex agnus-castus L.) и витекса коноплевидного (V. cannabifolia Sieb.), а также разработке настойки на его основе, стандартизации лекарственного растительного сырья и полученной настойки. С помощью качественных реакций, ТСХ, ГХ-МС и ВЭЖХ в листьях, стеблях и соцветиях витекса священного и витекса коноплевидного установлено наличие разных классов углеводов, жирных, гидроксикоричных, амино- и других классов органических кислот, иридоидов, флавоноидов, дубильных веществ, лигнанов, моно-, сескви- и дитерпенов, а также тритерпеновых сапонинов, гидроксикоричных кислот, и других классов соедидений. Всего идентифицированно 143 соединения, из них 20 в исследуемом сырье найдены впервые. Из листьев витекса священного выделено и установлено структуру 7 соединений: 1 ароматическая кислота, 3 флавоноида, 2 иридоида и 1 дитерпен. Методом ГХ-МС в листьях, соцветиях и стеблях витекса священного и витекса коноплевидного был определен качественный состав и количественное содержание ряда биологически активных соединений – жирных и карбоновых кислот, липофильных и летучих соединений. В результате было установлено содержание 17 жирных кислот, среди которых во всех видах сырья преобладали ненасыщенные жирные кислоты. Наибольшее содержание летучих соединений обнаружено в стеблях витекса священного (6187,5 мг/кг) и соцветиях витекса коноплевидного (6454,3 мг/кг), среди групп соединений превалируют сесквитерпеноиды. Главным компонентом летучих соединений витекса коноплевидного является β-кариофиллен (от 52,17 % в соцветиях до 56,12 % в стеблях). Для стеблей витекса священного характерным является преобладание транс-β-фарнезена (15,39 %), спатуленола (14,33 %) и эпи-α-кадинола (10,98 %). В листьях и соцветиях доминирует β-кариофиллен (25,54 % и 18,30 % соответственно). Также этим методом было качественно и количественно определено 6 алифатических, 6 ароматических и 2 гидроксикоричные кислоты, установлено наибольшее содержание п-гидроксибензойной кислоты. Методом атомно-адсорбционной спектроскопии установлен элементный состав исследуемого сырья, было обнаружено и установлено количественное содержание 6 макро- и 13 микроэлементов. Впервые определено количественное содержание ВРПС (до 6,03%), пектинов (до 3,25%) и гемицеллюлозы А и Б (до 2,33% и 0,23% соответственно) в листьях, стеблях и соцветиях витекса священного и витекса коноплевидного. Методом ВЭЖХ проведено количественное определение 2 иридоидов, 2 флавоноидов и 2 гидроксикоричных кислот. Методами УФ-спектрофотометрии установлен количественный состав суммы флавоноидов, гидроксикоричных кислот, таннинов, иридоидов, органических кислот, аминокислот, а также разных фракций углеводов в сырье витекса священного и витекса коноплевидного. Проведено сравнительное количественное определение отдельных органических кислот в листьях, стеблях и соцветиях и установлены особенности их накопления в различных видах сырья. Во всех видах сырья доминирует п-гидроксибензойная кислота. Проведенное изучение динамики накопления БАВ в листьях, соцветиях и стеблях в течение вегетации показало наивысшее содержание фенольных соединений во всех видах сырья в период бутонизации и цветения. Определены основные анатомо-диагностические признаки листьев витекса священного и витекса коноплевидного. Листья растений обоих видов отличаются строением игольчатых волосков нижнего эпидермиса, типом устьичного аппарата, а также наличием головчатая волосков. Предложена технология получения настойки листьев витекса священного методом перколяции. Экстрагентом избран 70% спирт этиловый, соотношение сырье: экстрагент - 1:10, экстракция четырехкратная общей продолжительностью 48 ч при температуре 15-20 ° С. Фармакологические исследования показали наличие антирадикальной, седативной и гепатопротекторной активности настойки листьев витекса священного и настойки листьев витекса коноплевидного. Исследуемые настойки практически нетоксичны. Разработаны предложены проекты методик контроля качества «Листья витекса священного», «Листья витекса коноплевидного» и «Настойка листьев витекса священного».

The thesis is devoted to the complex pharmacognostic study of chaste-tree (Vítex agnus-castus L.) and Chinese chaste-tree (V. cannabifolia Sieb.) aerial parts, developing of new phytoremedies on its basis, and standardization of plant material and obtained tincture. The qualitative composition and quantitative content of the main groups of biologically active substances in the leaves, stems and inflorescences of V. agnus-castus and V. cannabifolia was determined. 7 Сompounds from the leaves of chaste-tree were isolated and qualified: 1 carboxylic aromatic acid, 3 flavonoids, 2 iridoids, 1 diterpen. Using methods of GC-MS, HPLC, atomic absorption spectroscopy and UVspectrophotometry the identification and quantification of flavonoids, hydroxycinnamic acid derivatives, tannins, iridoids, aminoacids, different types of carbohydrates, carboxylic acids, terpenes, fatty acids and trace elements was performed. Leaves of chaste-tree and Chinese chaste-tree were standardized and technology of V. agnus-castus tinctures was proposed. Developed phytoremedies were non-toxis and revealed radical scavenging, sedative and hepatoprotective activities.