Development of the methods for identification and quantitative determination of epifine – a new perspective anticonvulsant

Abstract

According to the results of the pharmacological testing the substance of 4-methoxy-3-chloroanilide 1-(3’-fluorophenyl)- 5-methyl-1,2,3-triazole (1H)-4-carboxylic acid has shown a pronounced anticonvulsant activity that exceeds the level of the reference drug – Depakine. It is recommended for further profound studies under conditional name Epifine. Development of methods for the quality control of a substance occupies an important place among the stages of drug introduction.For preparation of the substance to introduction we have developed the methods for identification and quantitative determination of the promising substance Epifine. Standardization has been performed in accordance with the existing requirements for development of modern methods for analysis of pharmaceutical substances possessing the pharmacopoeial quality. For identification a set of physical, physicochemical (NMR 1H, IR and UV spectroscopy) and chemical methods has been proposed. The physical and chemical properties of Epifine have been investigated, and the intervals of melting point and solubility in different solvents have been determined. As expected, in the IR spectrum the characteristic absorption bands confirming the presence of aromatic rings, in particular benzene and triazole, carbonyl groups (amide-1, amide-2), substituted amino group, methyl and methoxy groups, were observed. We have also proposed the chemical methods of identification of this compound conditioned by the presence of the anilide residue, the triazole ring, and covalently bound halogens. The non-aqueous acid-base titration has been developed for the quantitative analysis of Epifine.

За результатами фармакологічних випробувань субстанція 4-метокси-3-хлораніліду 1-(3’-фторофеніл)- 5-метил-1,2,3-триазол(1Н)-4-карбонової кислоти виявила високу протисудомну активність, що пере- вищує рівень препарату порівняння Депакіну, тому вона була рекомендована для подальших поглибле- них досліджень під умовною назвою «Епіфін». Серед етапів впровадження лікарських засобів важливе місце посідає розробка методик контролю якості субстанції. Для підготовки речовини до впроваджен- ня нами було здійснено розробку методик ідентифікації та кількісного визначення. Стандартизацію здійснювали відповідно до існуючих сучасних вимог до розробки методик аналізу фармацевтичних суб- станцій фармакопейної якості. Досліджені фізико-хімічні властивості субстанції Епіфін, встановлені інтервали температури плавлення та розчинність у різних розчинниках. Для ідентифікації запропо- новано сукупність фізичних, фізико-хімічних (ІЧ-, УФ- та ЯМР 1H-спектроскопія) та хімічних методів. В ІЧ-спектрі очікувано спостерігаються характеристичні смуги поглинання, що підтверджують наявність ароматичних кілець, зокрема фенільного та триазольного; карбонільної групи (амід-1, амід-2), заміщеної аміногрупи, метильної та метоксигруп. Запропоновані хімічні методики ідентифікації цієї сполуки, обу- мовлені наявністю триазольного кільця, анілідного залишку, ковалентнозв’язаних галогенів. Для кількісного визначення Епіфіну розроблений метод кислотно-основного титрування у неводному середовищі.

По результатам фармакологических испытаний субстанция 4-метокси-3-хлоранилида 1-(3’-фторфенил)-5-метил-1,2,3-триазол (1Н)-4-карбоновой кислоты показала выраженную противосудорожную ак- тивность, превышающую уровень препарата сравнения Депакина, поэтому она была рекомендована для дальнейших углубленных исследований под условным названием «Эпифин». Среди этапов внедрения лекарственных средств важное место занимает разработка методик контроля качества субстанции. Для подготовки вещества к внедрению нами была осуществлена разработка методик идентификации и количественного определения. Стандартизацию осуществляли в соответствии с суще- ствующими современными требованиями к разработке методик анализа фармацевтических субстан- ций фармакопейного качества. Были исследованы физико-химические свойства субстанции Епифин, установлены интервалы температуры плавления и растворимость в различных растворителях. Для идентификации нами предложена совокупность физических, физико-химических (ЯМР 1H, ИК- и УФ-спектроскопия) и химических методов. В ИК-спектре, как и ожидалось, наблюдаются характеристические полосы поглощения, подтверждающие наличие ароматических колец, в частности, фенильного и триазольного; карбонильной группы (амид-1, амид-2), замещенной аминогруппы, метильной и метоксигрупп. Также нами предложены химические методики идентификации этого соединения, обусловленные наличием триазоль- ного кольца, анилидного остатка, ковалентно связанных галогенов хлора и фтора. Для количественного определения Эпифина разработан метод кислотно-основного титрования в неводной среде.