Забезпечення якості біохімічних досліджень за допомогою валідаційних процедур у лабораторії клінічної діагностики Клініко-діагностичного центру Національного фармацевтичного університету на прикладі методик визначення рівнів загального та прямого білірубіну у біологічних рідинах

Abstract

Основними принципами створення системи якості у сучасній лабораторній діагностиці є наступні: стандарти- зація лабораторних процесів через розробку стандартних операційних процедур; загальне управління якістю клінічних лабораторних досліджень на основі розробки та виконання вимог міжнародних стандартів; контроль за якістю всіх етапів лабораторного процесу через впровадження процедури валідації. Мета. Дослідження аспектів забезпечення якості у лабораторії клінічної діагностики Клініко-діагностичного центру НФаУ шляхом проведення валідаційних процедур з оцінки придатності біохімічних методик. Матеріали та методи. Об’єктами дослідження стали стандартизовані біохімічні методики визначення рівнів загального та прямого білірубіну у зразках біологічних рідин. У якості контрольної сироватки був обраний «Хімічний контроль. Набір реагентів. Рівень 1» виробництва High Technology, Inc. (США) з відомою концен- трацією аналітів. Вимірювання проводилися на автоматичному біохімічному аналізаторі Express Plus фірми Bayer (Німеччина). При обробці результатів досліджень були використані показники описової статистики та проведено ряд статистичних оцінок. Результати. Процедура валідації методик складається з кількох етапів. Спочатку був складений валідаційний сценарій: встановлені особливості методик визначення загального та прямого білірубіну в біологічних ріди- нах; проаналізовані параметри, які потрібно оцінювати. Потім були розроблені протоколи для оцінки придат- ності даних методик та визначені валідаційні характеристики. Оцінка внутрішньолабораторної збіжності та відтворюваності методик визначення концентрації загального та прямого білірубіну фотометричним методом при роботі на біохімічному аналізаторі Еxpress Рlus, яка була проведена двома операторами-лаборантами од- накової кваліфікації, вказує на відсутність грубих помилок у роботі аналізатора та статистично важливих від- мінностей при проведенні вимірювань. Оцінка правильності методик, проведених за допомогою контрольної сироватки, довела, що систематична похибка не значима (по заданому критерію прийнятності). Отже, дані методики, які були атестовані, забезпечують правильність вимірів у межах лабораторії. Розширена невизна- ченість, яка була розрахована як метрологічна оцінка придатності, показала, що отримані значення рівнів за- гального та прямого білірубіну можна вважати точними та достовірними. Висновки. Валідація методик визначення загального та прямого білірубіну в крові людини фотометричним методом довела, що дані методики мають робочі характеристики, які відповідають регламентованим, задо- вольняють встановленим критеріям, а вимірювані за їхньою допомогою параметри відповідають належним.

The main principles for creation of the quality system in modern laboratory diagnostics are standardization of laboratory processes by developing standard operating procedures; general quality management of clinical laboratory research based on development and implementation of the requirements of international standards; the quality control at all stages of the laboratory process through introduction of the validation procedure. Aim. To study the quality assurance aspects in the Laboratory of Clinical Diagnostics of the Clinical and Diagnostic Center of the National University of Pharmacy (NUPh) by carrying out the validation procedures for assessing the intralaboratory reproducibility of biochemical methods. Materials and methods. The objects of the study were the standardized biochemical methods for determining the levels of total and direct bilirubin in the samples of biological fluids. As a control serum “Chemical control. Reagent kit” manufactured by High Technology, Inc. (USA) with the known concentration of analytes was used. The measurements were performed on an Express Plus automatic biochemical analyzer (Bayer, Germany). When processing the results of the study the indicators of descriptive statistics were used, and a number of statistical estimates were made. Results. The procedure for validating the method consists of several stages. First of all, the validation scenario was compiled: the peculiarities of the methods for determining total and direct bilirubin in biological fluids were determined; the parameters to be evaluated were analyzed. Secondly, protocols were developed for assessing the suitability of these methods, and the validation characteristics were determined. The intralaboratory convergence and reproducibility of the methods for determining the concentration of total and direct bilirubin by the photometric method when working with an Еxpress Рlus biochemical analyzer was assessed by two operators-technicians of the same qualification. It indicates the absence of gross errors in the analyzer operation and statistically significant differences in the measurement. The assessment of correctness of the methods performed using the control serum proved that the systematic error was insignificant (according to the acceptance criterion specified). Thus, these methods, which have been certified, provide the correctness of measurements within the laboratory. The increased uncertainty calculated as a metrological assessment of acceptability has shown that the values of total and direct bilirubin levels obtained can be considered to be accurate and reliable. Conclusions. Validation of the methods for determination of total and direct bilirubin in the human blood by the photometric method has proven that these procedures have performance characteristics that correspond to the regulated ones, meet the criteria set, and the parameters measured with them correspond to the proper ones.

Основными принципами создания системы качества в современной лабораторной диагностике являются: стандартизация лабораторных процессов путем разработки стандартных операционных процедур; общее управ- ление качеством клинических лабораторных исследований на основе разработки и выполнения требований международных стандартов; контроль качества на всех этапах лабораторного процесса через внедрение про- цедуры валидации. Цель. Исследование аспектов обеспечения качества в лаборатории клинической диагностики Клинико-диа- гностического центра НФаУ путем проведения валидационных процедур по оценке внутрилабораторной вос- производимости биохимических методик. Материалы и методы. Объектами исследования стали стандартизированные биохимические методики опреде- ления уровней общего и прямого билирубина в образцах биологических жидкостей. В качестве контрольной сыворотки был выбран «Химический контроль. Набор реагентов» производства High Technology, Inc. (США) с известной концентрацией аналитов. Измерения проводились на автоматическом биохимическом анализато- ре Express Plus фирмы Bayer (Германия). При обработке результатов исследований были использованы пока- затели описательной статистики и проведен ряд статистических оценок. Результаты. Процедура валидации методик состоит из нескольких этапов. Прежде всего был составлен вали- дационный сценарий: установлены особенности методик определения общего и прямого билирубина в био- логических жидкостях; проанализированы параметры, которые нужно оценивать. После этого были разра- ботаны протоколы для оценки пригодности данных методик и определены валидационные характеристики. Оценка внутрилабораторной сходимости и воспроизводимости методик определения концентрации общего и прямого билирубина фотометрическим методом при работе на биохимическом анализаторе Еxpress Рlus, ко- торая была проведена двумя операторами-лаборантами одинаковой квалификации, указывает на отсутствие грубых ошибок в работе анализатора и статистически важных различий при проведении измерений. Оценка правильности методик, проведенных с помощью контрольной сыворотки, доказала, что систематическая по- грешность незначима (по заданному критерию приемлемости). Таким образом, данные методики, которые были аттестованы, обеспечивают правильность измерений в пределах лаборатории. Расширенная неопределенность, которая была рассчитана как метрологическая оценка приемлемости, показала, что полученные значения уровня общего и прямого билирубина можно считать точными и достоверными. Выводы. Валидация методик определения общего и прямого билирубина в крови человека фотометрическим методом доказала, что данные методики имеют рабочие характеристики, которые соответствуют регламен- тированным, удовлетворяют установленным критериям, а измеренные с их помощью параметры соответству- ют надлежащим.